文档介绍：基因工程的表达体系
操纵子理论在基因工程中的应用
目的基因翻译表达及其准确性
常用基因载体
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基因载体是一类能自我复制的DNA分子,其中的一段DNA被切除而不影响其复制,可用以置换或插入外源(目的) DNA而将目的DNA带入宿主细胞。
常用的载体有质粒、噬菌体、病毒
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基因工程的表达体系
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原核生物表达体系:
大肠杆菌、枯草杆菌、农杆菌
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大肠杆菌表达体系的优点:
积累了充足经验,有数不清的载体可供应用;
可因不同载体而选择不同菌种作宿主;
操作安全,致病能力低;
成本相对低得多;
真核生物的基因先在原核体系上构建克隆,称为亚克隆(subclone),然后采用其它方式转移至真核细胞上表达。
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缺点:
原核生物载体构建的重组体是无法进入动物细胞进行表达;
没有加工所需的酶系统;
热源、内***不易除去;
常会形成包涵体。
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表达体系的发展
 
表达体载体宿主
第一代原核生物表达体系质粒、噬菌体细菌
第二代酵母表达体系穿梭质粒酵母
第三代哺乳类细胞表达体系病毒、脂质体培养细胞
第四代基因直接导入 DNA本身生殖细胞、
体细胞、个体
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基因工程的目的是使目的基因能高效表达。
基因表达受DNA结构、蛋白质因子与核酸相互辨认、结合等组成的表达体系的调控。
基因表达调控可在转录、转录后修饰、翻译、翻译后修饰等水平进行
基因工程载体的构建必需应用表达调控的基本理论知识,应用已知的调控序列进行重组、改造。
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操纵子理论在基因工程的应用
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