文档介绍：基因的剪刀——限制性内切酶(简称限制酶)
(一)基因操作的工具
限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶,能将外来的DNA切断,由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性内切酶。
特点:特异性。
即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。
大肠杆菌()的一种叫做EcoRⅠ的限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。
限制酶
限制酶
被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,它们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。
被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?
基因的针线:DNA连接酶
G A A T T C
C T T A A G
G A A T T C
C T T A A G
G
C T T A A
A A T T C
G
G
C T T A A
A A T T C
G
G
C T T A A
A A T T C
G
用同种限制酶切割
基因的针线——DNA连接酶
DNA连接酶可把脱氧核糖和磷酸交替连接的DNA骨架上的缺口“缝合”起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组的DNA分子就形成了。
磷酸二酯键