文档介绍：南昌大学医学院
硕士学位论文
角膜内皮细胞压力调控及高压力损伤机制的研究
姓名:梁玲玲
申请学位级别:硕士
专业:眼科学
指导教师:廖洪斐
20100601
摘要本研究拟通过体外压力培养平台,分析不同压力梯度下角膜内皮细胞的形态和结构特点,以及其生物学功能的变化规律。探讨正常眼压对角膜内皮细胞活性的正向调节作用,为建立旨在提高角膜内皮细胞培养质量的三维仿生培养系统提供理论依据;阐明病理性高眼压下角膜内皮细胞损伤的病理基础和调控环节,为青光眼治疗策略中的内皮细胞保护提供实验依据。方法:第一部分角膜内皮细胞体外常规培养将带有兔角膜内皮细胞的后弹力层完整撕下,���ヒ鹊鞍酌敢�������:厦富��炕�慕悄つ谄は赴��刑逋馀嘌�5怪孟晕⒕迪鹿�察细胞形态,神经元烯醇化酶抗体进行细胞表型鉴定,�染色观察细胞形态结构,分析培养角膜内皮细胞的活性与纯度。第二部分角膜内皮细胞正常压力仿生培养设计并制作自动充压范围为������难沽ξ�峙嘌�爸茫�舛ㄔ�设压力的维持时间,确定自动充压的时间点。将接种了传代角膜内皮细胞的培养板放入压力预设为��难沽ξ�峙嘌�爸弥校��谐中�嘌�5�置显微镜定期观察细胞形态及生长规律。�染色及扫描和透射电镜分析细胞结构的变化,茜素红一台盼兰联合染色和�����流式细胞术分析细胞活性。第三部分高眼压对角膜内皮细胞损伤机制的研究通过体外仿生培养系统,模拟临床青光眼的病理过程,将压力分为压力急性增高组����、压力慢性增高组����、波动组���������⒄�Q沽ψ�����魑6哉兆椤5怪�显微镜定期观察细胞形态及生长规律,�染色分析细胞结构的变化,茜素红一台盼兰联合染色和�����流式细胞术分析细胞活性,���分摘要目的:��~�
醇觳獾紽舯��谋泶铮�哐钩中�饔孟碌蛲鱿喙氐鞍譖�析��疐��谘沽ψ饔孟碌谋泶锕媛桑琖���.����检测不同压力组凋亡相关蛋白���和��氖笨樟炕��撸�庖哂ü夤鄄斓蛲銎舳�笙赴����的表达强度及范围。结果:�⒑蟮�Σ闼撼�:厦赶��ɑ竦么罅看炕�慕悄つ谄は赴��焖偬��生长并增殖,体外培养���慈诤铣傻ゲ阆赴��泶锷窬�O┐蓟�缚固�阳性,�染色及活性染色提示细胞功能良好。�⑸�硌沽�肪撑嘌�碌慕悄つ谄は赴��せ钚粤己茫�赴�⑻甯星俊�外形扁平呈六边形,细胞间连接紧密,更接近机体生理状态下生长的内皮细胞。生理压力下未见明显的细胞凋亡现象。�⒏哐够肪诚屡嘌�慕悄つ谄は赴��鲋郴郝���宕蠖�该鳎����含较多的颗粒,细胞间隙增宽。随压力越高,培养时间的增长,�����达增强,凋亡细胞比例显著增加。的表达显著上调,���表达则随之下降,使用抑制剂预处理的细胞,其蛋白��谋泶锝衔丛ご�淼南赴�飨韵陆担珺�.�泶锩飨栽黾印8哐棺榻悄つ谄�细胞胞浆���的阳性表达显著增加。结论:���Q沽Ψ律�嘌�肪常�越悄つ谄は赴�墓δ苡姓�虻鹘谧饔茫��导角膜内皮细胞骨架的改变,使其物理形态更接近体内的角膜内皮细胞,同时促进体外培养角膜内皮细胞之间连接功能的建立,为工程化角膜内皮移植膜的构建提供了新的环境模式诱导平台。��垩沟牟ǘ�杂虢悄つ谄は赴�乃鹕酥�浯嬖谙喙匦裕�哐沽Χ越悄�内皮细胞有损伤作用,导致细胞凋亡的发生,并且呈现时间一量效曲线。��沽Φ骺叵孪赴�蛲銎舳�揪妒墙悄つ谄は赴鸆��酉吡L迨头湃氚�浆,通过激活凋亡的内源性途径实现。�瓹����梢宰魑G喙庋鄹哐垩苟越悄つ谄は赴�鹕说囊┪锔稍ぐ�点,为青光眼治疗策略中的内皮细胞保护提供实验依据。关键词:角膜内皮细胞;压力;仿生培养;凋亡摘要��
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缩略词简表兔角膜