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刁化戈雅研究生签名菊黟/月�日时间:瑚瞬∥月歹&关于论文使用授权的说明独创性声明时间:�弈四�≥。,��/月矽日�C艿难�宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵��本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。写过的研究成果,也不包含为获得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并本人完全了解青岛农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰表示了谢意。交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名导师签名:时间:,
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最适��衄�的���化,获得了优化的��逑导捌銹�扩增条件。引物��疨职:最适��摘要�鰋�膁��即鸡腿菇黑头病和疑似金针菇胡桃肉状菌病的病原微生物分别为轮枝菌�縞日托�硼“肌平菇黄腐病:��疨�;双孢菇褐斑病:��疭�;鸡腿菇黑头病:��痬�灰伤平��ご恕5腡�酶���梗琈����止,���畃��的�该窸.�螅琈��温度�℃。引物�/饵喂:最适����此,���ね�5腡�酶�������Ⅱ州;最佳退火温度�℃。引物��痭Ⅳ�鹤钍�.���皿,�畗�’�腡�酶���螅琈��随着食用菌生产的周年化、规模化的发展,食用茵病害对食用菌生产的影响成为目前主要面临的问题。但我国对于食用菌病害的研究基础相对薄弱,因此,加强对食用菌病害的深入研究是非常重要的。本实验研究期间,针对山东省内草菇、鸡腿菇、平菇、金针菇、双孢菇、香菇等菇类共采集病害样品�份。其中真菌病害有�种,细菌病害�帧Mü�臣品⑾郑�谑�用菌栽培过程中发菌期的病原微生物主要以真菌为主,褐斑及腐烂病大多都是细菌性通过��法、��法结合���夯厥帐约梁蟹ā��法及��法后纯化�諨�提取方法比较,得出最佳的病害样品宏基因组��崛》椒ㄎ狢��ń岷����夯厥帐约梁蟹ā�本研究主要以平菇黄腐病、双孢菇褐斑病、鸡腿菇黑头病、疑似盒针菇胡桃肉状茵病�质秤靡鸩『ψ魑Q芯坎牧希������通用引物分别对病害样品基因组���蠵�扩增,其产物纯化后,连接转化并进行单克隆测序。序列分析结果表明:两种细菌性病害即平菇黄腐病和双孢菇褐斑病的病原微生物分别为荧光假单胞杆菌�瑂�叭缂�玎口�丁皁阳��瑉�和假单胞杆菌�已扰如�咒口��.�A街终婢�圆『�通过对所测病原菌序列与其相关菌的����序列进行同源位点排列和比对,利用�������.�砑�悦恐植『ι杓瞥隽薼对相对最佳的特异引物。针菇胡桃肉状菌病:Ⅳ,�疛�。对所设计的�砸�锝�刑匾煨约觳猓�通过对引物特异性扩增体系及条件进行了优��Ⅱ�;最佳退火温度�℃。引物��疭�:�;最佳退火温度�℃。对不同特异引物��┰龅牧槊舳冉�屑煅椋�峁�砻鳎浩焦交聘�『鸵伤平鹫�菇胡桃肉状茵病的特异引物可以检测到�羖���·肛�以上的病害样品基因组������和���.�蚉�����蝐����或����蛔罴淹嘶���的������的。�.。��“��.����甇
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孢菇褐斑病和鸡腿菇黑头病可以检测到���玭�こ禠‘�陨系牟『ρ�坊�蜃镈�。为了能够进一步完善和改进特异性引物对食用茵病害的检测诊断,还需要对引物特异性在更多种类的病原茵或病害样品进行的检验。基于宏基因组技术对食用菌病害的初步分析研究,以及通过特异引物对病害的检测为食用茵病害的研究提供新的理论依据。关键词:食用菌病害;病原微生物;宏基因组;序列分析;特异引物
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