文档介绍：FNCPJZCY0055 茶有机磷农药及氨基甲酸酯农药残留量的测定酶抑制法

F_NCP_JZ_CY_0055
茶—有机磷农药及氨基甲酸酯农药残留量测定—酶抑制法

1 范围
本方法适用于茶叶中有机磷农药及氨基甲酸酯农药残留的测定。
2 原理
有机磷农药及氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的活性有抑制作用,在一定条件下,其抑制
率取决于农药种类及其含量。
在 pH8 的溶液中,碘化硫代乙酰胆碱被胆碱酯酶水解,生成硫代胆碱。硫代胆碱具有还
原性,能使蓝色的 2,6-二***靛酚褪色,褪色程度与胆碱酯酶活性正相关,可在 600nm 比色
测定,酶活性愈高时,吸光度值愈低。当样品提取液中有一定量的有机磷农药或氨基甲酸酯
类农药存在时,酶活性受到抑制,吸光度值则较高。据此可判断样品中有机磷农药或氨基甲
酸酯农药的残留情况。样品提取液用氧化剂氧化,可提高某些有机磷农药的抑制率,因而可
提高其测定灵敏度,过量的氧化剂再用还原剂还原,以免干扰测定。
3 试剂
底物溶液:碘化硫代乙酰胆碱水溶液(1+49),1g 碘化硫代乙酰胆碱,加缓冲液溶解并定
溶至 50mL。
缓冲液:pH8 的三羟***氨基甲烷(Tris)-盐酸缓冲液:50mL Tris 加
盐酸加水定溶至 100mL。
显色剂:%2,6-二***靛酚水溶液(1+2499)。
氧化剂:次***酸钙水溶液(1+199)。
还原剂:亚***钠水溶液(1+9)。
胆碱酯酶液: 酶粉加 10mL 缓冲液溶解。。
脱色剂:活性炭。
***:分析纯。
碳酸钙:分析纯。
4 仪器设备
分光光度计。
5 样品测定
样品提取
取茶置于 10mL 烧杯中,加 5mL ***浸泡 5min,不时振摇,再加碳酸钙。
注:以上操作应在 15~35℃温度下进行。
氧化
***提取液于5mL 烧杯中,。,摇匀后
放置10min。,摇匀。
酶解
加入酶液 ,摇匀,放置10min,再加入底物溶液 ,显色剂 ,放置 5min 后测
定。
测定