文档介绍：icDiversityAnalysisOfLactariusDelicioSUSCheny曲uaAthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheRequirementsforthedegreeofMasterofSciencelnMicrobiologyCentralSouthUniversityofForestryandTechnology498ShaoshanSouthRoad,TianxinDistrictChangshaHunan410004,—angJune,2013中南林业科技大学11学位论文原创性声明Y2317226本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品,也不包含为获得中南林业科技大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式表明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。-L一/-.作者签名:l獬矽f’年b月1日中南林业科技大学学位论文版权使用授权书晡磺∥∥一导,瓣彤作者签名:予{|i玉耸导师签名f矽叮{仰≯I)年6月1日2口『)年b月乙日摘要松乳菇是与松、杉、柏等树木共生的外生菌根真菌,具有重要的食、药用及生态价值。中国幅员辽阔,地理和气候环境十分复杂,孕育了丰富的松乳菇种质资源,国内外已研究了其营养与活性成分、发酵与栽培技术等,但对其分子系统与遗传多样性还没有进行研究。分子技术具有简便、特异性高、准确可靠的优点己成为真菌遗传学各领域的重要工具,越来越多地应用于外生菌根真菌研究中。系统发育和遗传多样性是进行菌种鉴别与保护的理论基础。本论文通过单核苷酸多态性(SNP)和简单重复序列区间标记(ISSR)的方法研究了松乳菇ITS序列碱基种内变异;松乳菇在乳菇属内的系统发育地位;松乳菇的遗传多样性及不同地理来源松乳菇间的亲缘关系。得到的主要结果如下:(1)松乳菇ITS序列种内碱基变异与松乳菇在乳菇属内的系统发育地位。本研究提取江苏、云南、江西、湖南、广西、安徽、湖北地区的松乳菇、红汁乳菇(Lhatsudake)、橙色乳菇(￡.akahatsu)和鲑色乳菇(￡.salmonicolor)的基因组DNA,扩增ITS序列,并从genbank下载乳菇属其它8个种的ITS序列,分别对松乳菇ITS序列的碱基组成、变异位点及碱基替换类型进行分析,构建乳菇系统发育树。结果显示:松乳菇ITS序列共有20bp长度的变化,碱基C、T含量大于G、A含量。变异位点ITS共有99个(ITSl58个,,ITS237个)。松乳菇ITS序列中主要是T与C的转换,转换位点与颠换位点数分别为8个和5个。ITSl、、,,。基于ITS序列计算不同地区松乳菇问的遗传距离,江西与意大利、江西与西班牙,,云南和法国序列间遗传距离最小0。总体上松乳菇在种内具有较低的ITS变异,系统发育显示松乳菇与红汁乳菇、橙色乳菇亲缘关系较近(2)松乳菇的遗传多样性及不同地理来源松乳菇间的亲缘关系分析。采用ISSR分子标记技术,利用6条引物对供试的90株松乳菇的多样性进行分析。6条引物共扩增出103条DNA片断,,,,%,,地域聚类不明显。,,Nei’,Shannon’s信息指数(I),基因流(Nm)。总体上中国境内松乳菇具有较大的基因流,不同地域来源松乳菇聚类不明显。关键词:松乳菇;ITS;ISSR;系统发育;,fermentatio