文档介绍：淮海工学院综合大实验报告书题目:生物化学大实验系(院):海洋学院专业:生物技术班级:生技101姓名:陈帅学号:52**********年12月生物化学大实验酶的特异性及温度、pH对酶活性的影响2011年12月第2页酶的特异性及温度、pH对酶活性的影响班级:生技101姓名:陈帅学号:521002101【摘要】唾液淀粉酶是生物催化剂,在人体内有着重要作用。现代科学研究在酶添加壳聚糖的基础上,开发了一代有创新性的产品—加酵素壳聚糖健康食品。本文通过比较在不同条件下唾液淀粉酶对淀粉的水解情况,进而了解不同温度、pH对酶活性的影响以及酶的特异性。【关键词】唾液淀粉酶,温度,pH,特异性1前言酶[1]是人体内新陈代谢的催化剂,人体内才能进行各项生化反应它们支配着生物的新陈代谢、营养和能量转换等许多催化过程,与生命过程关系密切。酶与一般催化剂的最主要区别就是具有高度的特异性,即专一性。所谓特异性是指酶对所作用的底物有严格的选择性,即一种酶只能对一种化合物或一类化合物起一定的催化作用。酶的特异性实验是生物化学实验之一,适用于临床、妇产、中医、康复、药学、检验等专业。由于大多数酶是蛋白质,其活性受温度、pH等多种因素的影响。[2]蒸馏水,NaCl(分析纯,中国上海试剂一厂),可溶性淀粉(化学纯,广州医药站化学试剂公司),蔗糖(分析纯,国药集团化学试剂有限公司),CuSO4(分析纯,上海试一化学试剂有限公司),柠檬酸钠(分析纯,中国上海试剂一厂),无水Na2CO3(分析纯,南京化学试剂一厂),KI(化学纯,南京化学试剂有限公司),Na2HPO4·2H2O(分析纯,江苏省连云港市化学试剂厂),浓HCl(分析纯,南京化学试剂有限公司),NaOH。①唾液淀粉酶的制备:用烧杯取蒸馏水或自来水,含于口中,1—2分钟后,吐入50mL烧杯中,备用。生物化学大实验酶的特异性及温度、pH对酶活性的影响2011年12月第3页②Benedict试剂A、,冷后稀释至150mL;B、取柠檬酸钠173g及无水Na2CO3100g,加水600mL加热使之溶解,冷后稀释至850mL;C、将A液缓慢注入B液中,混匀备用。(可长期保存)。③:·,;④:·;⑤:·,;⑥%%的淀粉液:、,加入200mL水,于电炉上加热,边加热边用玻璃棒搅拌,直至液体澄清。待冷却后转移至250mL容量瓶,定容。⑦%的蔗糖溶液:,加水溶解,定容至100mL。⑧KI-I溶液:称取碘化钾3g溶于蒸馏水中,待全部溶解后再加I1g,振荡溶解,定容至100mL。(8支)移液管(7支)胶头滴管,小烧杯(2个,100ml)大烧杯(1000ml)BP221S型电子天平HW·YS型电子恒温水浴(37℃)A型50Hz220V—800W双层铁皮电炉石棉网pH试纸,①取两支试管编号1、2,%的淀粉液2mL,%的蔗糖液2mL;②与两支试管各加入制备好的唾液1mL;③将两支试管同时放入37℃恒温水浴锅中保温;生物化学大实验酶的特异性及温度、pH对酶活性的影响2011年12月第4页④15分钟后,取出两试管,各加入Benedict试剂1mL;⑤将两试管同时放入沸水中煮沸6分钟;⑥取两支试管,观察记录颜色的变化,并注意是否有红棕色产生。%的淀粉液(mL)2—%的蔗糖液(mL)—2制备好的唾液(mL)1137℃恒温水浴保温15minBenedict试剂(mL)11沸水浴6分钟→①取三支试管并编号3、4、5,%淀粉液及1mL唾液混匀;②将管3、管4、管5同时分别放入冰浴、37℃水浴、沸水浴中;③15分钟后,取出各管,分别加入碘液数滴,观察并记录各管颜色变化。%淀粉液(mL)555唾液(mL)111水浴(15min)冰浴37℃[4]①取试管3支编号6、7、8,按下表加入试剂;②3支试管