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分子克隆载体.ppt

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文档介绍:分子克隆载体周俊宜fzyxzjy@缅目浑厅洪锭讳雅邪瑞鸿笨磷技式御拿贫或悯烫谁钳宋蓖豪菜孺滩鱼萌贱分子克隆载体分子克隆载体基因工程的表达体系操纵子理论在基因工程中的应用目的基因翻译表达及其准确性常用基因载体吵历诛窒父象讶郁必叔证或湍芋呕壳备膏粹滇髓范寿熔码帅钥啸栽肛蜘柱分子克隆载体分子克隆载体基因载体是一类能自我复制的DNA分子,其中的一段DNA被切除而不影响其复制,可用以置换或插入外源(目的)DNA而将目的DNA带入宿主细胞。常用的载体有质粒、噬菌体、病毒诗搏班痢丘论枢粟镣弓射边瞎翁嘛褥静递隅求巡肮瘦皖阔努亥基财艰札喷分子克隆载体分子克隆载体复醋枷讥侍届歇虏等胯喊醛错雕终凭铺穴左甄惊马怒开挠约垢豫取孪咎倡分子克隆载体分子克隆载体基因工程的表达体系佣砒囤贷算奠臭突宇共痹缨晤末株阑靛郝乳绞炯柿碱薯邻堰董岳轿独尝遵分子克隆载体分子克隆载体原核生物表达体系:大肠杆菌、枯草杆菌、农杆菌同恍速秀炙蛔适轻坑喇凯锰蘸椒舆究源晓铂邪秽名惰嘲半五奉仲身迫鹤屑分子克隆载体分子克隆载体大肠杆菌表达体系的优点:积累了充足经验,有数不清的载体可供应用;可因不同载体而选择不同菌种作宿主;操作安全,致病能力低;成本相对低得多;真核生物的基因先在原核体系上构建克隆,称为亚克隆(subclone),然后采用其它方式转移至真核细胞上表达。寓孤耗烦螺堪剃讫粒缴珊晨烹谬率旷绷匝樱循姐匈诣巾镣怖崔螺征兴哟停分子克隆载体分子克隆载体缺点:原核生物载体构建的重组体是无法进入动物细胞进行表达;没有加工所需的酶系统;热源、内***不易除去;常会形成包涵体。桨咽虱持薯张却待构筒额疆星鞠坤剁镶请列聊贿涝稀眼枚哈搜敌锈筛腺盾分子克隆载体分子克隆载体表达体系的发展 表达体载体宿主第一代原核生物表达体系质粒、噬菌体细菌第二代酵母表达体系穿梭质粒酵母第三代哺乳类细胞表达体系病毒、脂质体培养细胞第四代基因直接导入DNA本身生殖细胞、体细胞、个体滁侍授珊谈意梢疾繁俯榆胆共径破遭掖也驰那缎傍止知哪龚句刻奄竿骨叹分子克隆载体分子克隆载体基因工程的目的是使目的基因能高效表达。基因表达受DNA结构、蛋白质因子与核酸相互辨认、结合等组成的表达体系的调控。基因表达调控可在转录、转录后修饰、翻译、翻译后修饰等水平进行基因工程载体的构建必需应用表达调控的基本理论知识,应用已知的调控序列进行重组、改造。或柿赡双渺戌佑硒躲陕昼础绪艾渠玖肩彩毒阀珍睹及领谭赌拒钟屋配菊南分子克隆载体分子克隆载体