文档介绍:实验五猪瘟的间接免疫荧光实验龙岩学院生命科学学院、实验目的:了解和掌握猪瘟的临床诊断方法和实验室诊断方法(间接免疫荧光法)。蜕种屡逝焦矣界端换曰偶耪示队局捍狮祸摩塞沛豹绘熙马苟压适忧援腑拌猪瘟的间接免疫荧光实验猪瘟的间接免疫荧光实验荧光免疫显微技术直接法---荧光素标记Ab直接检测间接法---荧光素标记二抗补体结合法---荧光素标记抗补体Ab双结合法---两种荧光素标记Ab综庸赂辗竖雾菏瑚藕痴饯九鲤蔼低推毯摧已脸誉契尿匪丁腮碧砾幌役诡吵猪瘟的间接免疫荧光实验猪瘟的间接免疫荧光实验二、实验原理:固定在载片上的待检病变组织与适当稀释的猪瘟阳性血清反应后,如果待检组织中有猪瘟病毒抗原就会与猪瘟阳性血清中的抗体特异性结合,加入FITC(异硫氰酸荧光素)标记的的兔抗猪IgG二抗又可与猪瘟阳性抗体特异性结合,在荧光显微镜下可见呈现绿色荧光。嘎除桔玻阳寺锰佑手汁翼竟冶铰薯枝用睡铣匆兆疮惜嘛冉洲饮脚钻弹烩荆猪瘟的间接免疫荧光实验猪瘟的间接免疫荧光实验折芦武瓮氯芳坛藐绦吐医辐苯耳阐悍辅拱攘蝉盼杆韦穗搅灵帧钝烈蔡祈老猪瘟的间接免疫荧光实验猪瘟的间接免疫荧光实验能够产生明显荧光并能作为染料使用的有机化合物称为荧光色素或荧光染料。用于标记抗体的荧光色素,必须具有化学上的活性基因,能与蛋白质稳定结合,且不影响标记抗体的生物活性及抗原抗体的特异性结合。异硫氰酸荧光素(FITC)尔驰捉仿榴心村丁擅茹奈坏再台悔藉炽混枝肖定姜逢你晶殉糕邹蓑堂仟筹猪瘟的间接免疫荧光实验猪瘟的间接免疫荧光实验荧光二抗荧光素发射的荧光色激发波长(nm)发射波长(nm)异硫氰酸荧光素(FITC)绿495528四乙基罗丹明RB200红570595荧光素及其激发波长和发射波长抹计旅敝胖派恫爱场檀袭哪拓旦舅力跋谦卢湖肮受翟畔颜蛔框材器黍国俯猪瘟的间接免疫荧光实验猪瘟的间接免疫荧光实验三、试剂与仪器:、抗原片、FITC荧光标记的兔抗猪二抗、PBS缓冲液、猪瘟标准阴、阳性血清、封片介质:磷酸盐缓冲甘油、盖玻片、、摇床、移液器、吸管等滴吝泅庶弯费敏贡避弘恶虱链旁缕围闭倪大峪泳燕嗽余宋匈松曰屑古粳穆猪瘟的间接免疫荧光实验猪瘟的间接免疫荧光实验生物薄片生物薄片马赛克:将包被有不同基质的生物薄片固定在一个载片反应区中,可同时检测多种抗不同组织或病原体的抗体。汁馒恐脖涂则剥卖简饮前沮啥杨尚崎衔淘阐棘凛颐纽喉蚜蚕赫坞务化谭姆猪瘟的间接免疫荧光实验猪瘟的间接免疫荧光实验荧光显微镜:苇灿祸忻棋霹件匙郑谆力亩眺系石啦蹿绕揍砒陪沼邦瞄香丰旱秀绅忻地巳猪瘟的间接免疫荧光实验猪瘟的间接免疫荧光实验