文档介绍：昆明理工大学医学院医学遗传学实验报告册姓名:班级:学号:遗传学教研室实验报告一一、实验原理:无精子因子(azoospermiafactor,AZF)是在1993年发现的已经被确认为精子发生所必须的。AZF基因位于Y染色体(Yq11)上,并在睾丸内特异性表达。探讨Y染色体上无精子因子(AZF)微缺失与男性不育的关系。应用多重PCR技术,检测AZF片段缺失。二、实验材料:1、病人全血标本样品。2、上下游引物一对。3、PCR反应体系(酶、buffer、DNTP等。)。4、琼脂糖、TAE溶液、EB、DNAloaldingbuffer。5、琼脂糖电泳仪(套),凝胶成像系统。6、PCR仪。三、实验方法:1、制备PCR反应体系。2、将引物和模板分别加入反应体系中。3、设置PCR反应程序、将反应体系放入PCR仪中。4、制备琼脂糖凝胶。5、将反应完毕的PCR体系取出适量,与loaldingbuffer混合加入到琼脂糖当中。6、设置电泳条件及时间,结束后用凝胶成像系统观察结果。四、实验结果:五、思考题: 1、根据实验结果,检测自己的实验结果是阳性还是阴性? 2、实验的检测结果说明了什么?实验报告二实验原理:人类外周血细胞本来是终末分化细胞,一般没有分裂能力,但经PHA(植物血球凝集素)或ConA等药物刺激后,转变成可分裂的转化细胞。向培养物中加入适量的秋水仙素,使纺锤体微管解聚,这样细胞停留在中期,可以获得大量的分裂细胞。用低渗盐溶液()处理,使其中的红细胞及分裂相细胞膜和一部分细胞质除去,最后以气干法制片,可获得较好的染色体标本。二、实验材料:(1)2ml注射器、培养瓶、离心管、吸管、量筒、载玻片。(2)超净工作台,恒温培养箱,天平,离心机、显微镜等。(3)试剂:①培养基的配制:(RPMI1640培养基4ml+小牛血清1ml+双抗各100IU/ml+)以5%~,4℃备用。②肝素:,%,灭菌。③秋水仙素:生理盐水配制成20μg/ml浓度,灭菌,分装,置-20℃。④低渗液:。⑤固定液:甲醇∶冰乙酸(3∶1),临时配制。⑥Giemsa工作液:1份原液和9份磷酸缓冲液,临时配制。⑦磷酸缓冲液:1/15mol/LNa2HPO4、1/15mol/LKH2PO4等体积混合。⑧5%NaHCO3灭菌滤器抽滤备用。三、实验方法:1、外周血接种:-,加入到配置好的1640培养基中。利用PHA刺激细胞增殖,培养72-96H。2、在收取细胞前加入秋水仙素(10ug/ml)10ul终止细胞分离,继续培养细胞2小时。3、将处理好的细胞标注清楚,放入离心机中,1600转离心7分钟。4、弃上清,加入已预热额kcl低渗溶液8ml,充分混匀,使细胞与低渗液充分接触,静置30分钟后1600转离心7分钟。5、弃上清,—2ml,充分混匀,静置30分钟后1600转离心7分钟。6、弃上清,再次加入固定液8ml,充分混匀,静置30分钟后1600转离心7分钟。7、弃上清,再次加入固定液6ml,充分混匀