文档介绍：茯苓菌种质量标准及检验规程
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:付杰王克勤苏玮方红邓芬
【摘要】目的规范茯苓菌种分离、培育方法,制定茯苓菌种质量标准及检验规程。方法在传统产区选择2~3代, kg以上的优质鲜菌种作为种苓,进行(母种、原种、栽培种)的分离与培养。结果制定了茯苓菌种质量标准及检验规程。结论标准及规程的建立保证了茯苓菌种的质量。
【关键词】茯苓菌种质量标准检验规程
茯苓为传统常用中药材,在我国有着两千多年应用历史[1],人工栽培的尝试始见于一千五百多年前南北朝时期的《本草经集注》,爰至南宋,栽培技术已臻完备,宋《癸辛杂识》记载的使用新鲜菌核作种的“肉引栽培”方法,一直沿用至20世纪60年代[2]。20世纪70年代初,在华中农业大学杨新美教授指导下,湖北成功地研制出“茯苓纯菌丝菌种”,并以其代替传统“肉引”作为种源,开创了茯苓的“菌种栽培”[3]。该种技术经三十多年应用,已在全国广泛推广。但是,由于各地在菌种分离、培育等具体方法方面存在一定差异,导致菌种质量不一[4]。1999~2002年,本课题组在承担
“九五”国家重点科技攻关项目“茯苓药材规范化种植研究”期间,初步规范了茯苓菌种分离、培育方法,制定了茯苓菌种质量标准及检验规程。目前,该项研究仍在继续进行。现将该项工作的初试情况报道如下。
1 茯苓菌种的分级
用于分离茯苓菌种的鲜茯苓菌核称为种苓,由种苓直接分离、培育的一级菌种,称为茯苓母种;母种经扩大培育的二级菌种,称为茯苓原种;原种经扩大培育的三级菌种,直接用于栽培种植,称为茯苓栽培菌种。
2 种苓来源及标准
种苓来源在传统产区,选择优良栽培菌株(品系),提前进行培育;在栽培培育出的新鲜菌核中,进行认真挑选。
种苓标准2~3代, kg以上的优质鲜菌核;个体较大,近球形;外皮较薄,颜色黄棕色或淡棕色,有明显的白色或淡棕色裂纹;生长旺盛,切或掰开后,内部苓***白,茯苓气味浓郁,有较多乳白色或淡青色浆汁渗出;外皮完整,无虫咬损伤,无腐烂异样。
种苓的储存与运输种苓选定后要及时进行分离使用;若需暂短储存或运往他地使用,必须埋在湿沙内,以防干燥。
3 培养基制备
母种培养基原料为马铃薯(去皮)200 g,葡萄糖20 g,松根或松木屑煎汁40 ml,琼脂20 g,水1 000 ml;将松根(或松木屑)加适量水(以淹没2~3 cm为度),煎煮30 min,用八层纱布(用水浸湿后拧干)过滤,取滤液静置1 h使沉降,取上清液浓缩至约40 ml,备用。将马铃薯去皮(挖去发芽薯块芽眼),洗净,切成薄片,用水冲洗干净,称取200 g,加水1 000 ml,煮沸至软而不烂为度,用八层纱布(用水浸湿后拧干)过滤,取滤液。称取琼脂20 g,加入马铃薯滤液中,煮至全部溶化。溶液中加入葡萄糖,搅拌溶化,再加入松根(或松木屑)煎汁,并加水补足1 000 ml,分装于试管或三角瓶中;将配制的母种培养基置高压灭菌锅内, kg/cm2压力(
℃)灭菌30 min;试管趁热摆放斜面,冷却后,备用。
原种培养基原料为小麦粒90%,松木屑10%,营养液(1%蔗糖、%***铵或硫酸