文档介绍：第一节 概述
高效液相色谱法：以气相色谱为基础，在经典液相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法。
一、HPLC与经典LC区别
二、HPLC与GC差别
三、特点及应用
*
37 碰撞
*
一、HPLC与经典LC区别
主要区别：固定相差别，输液设备和检测手段。
1．经典LC：仅做为一种分离手段。
柱内径1－3cm，固定相粒径>100μm 且不均匀。
重力加料输送流动相。
柱效低（H↑，n↓）。
分析周期长。
无法在线检测。
*
37 碰撞
*
2．HPLC：分离和分析
柱内径2-6mm，固定相粒径<10μm（球形，匀浆装柱）
高压输送流动相。
柱效高（H↓，n↑）。
分析时间大大缩短。
可以在线检测。
*
37 碰撞
*
二、HPLC与GC差别
相同：兼具分离和分析功能，均可以在线检测。
主要差别：分析对象的差别和流动相的差别。
1．分析对象：
GC： 能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品;
高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及
高聚物的样品不可检测；占有机物的20%。
HPLC： 溶解后能制成溶液的样品，
不受样品挥发性和热稳定性的限制。
分子量大、难气化、热稳定性差及高分子
和离子型样品均可检测；占有机物的80%。
*
37 碰撞
*
2．流动相差别：
GC：流动相为惰性气体。
组分与流动相无亲合作用力，只与固定相作用。
HPLC：流动相为液体。
流动相与组分间有亲合作用力，为提高柱的选择性、改善分离度增加了因素，对分离起很大作用。
流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用。
选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相。
可以增大分离选择性。
*
37 碰撞
*
3．操作条件差别：
GC： 加温操作。
HPLC：室温；高压（液体粘度大，峰展宽小）。
*
37 碰撞
*
三、HPLC的特点和应用
“三高” “一快” “一广”
高柱效——n=104片/米，柱效高（远高于一般LC）
高灵敏度
高选择性
分析速度快
应用范围广泛（可分析80%有机化合物）
*
37 碰撞
*
*
37 碰撞
*
第二节 基本理论
热力学理论：塔板理论——平衡理论基础
动力学理论：速率理论——Vander方程
一、塔板理论
*
37 碰撞
*
二 速率理论
GC: H=A+B/U+CU(填充柱)
H=B/U+CU(毛细管柱)
HPLC: H=A+CU
B=2γD,对于HPLC，因Dm较小，
B项可忽略
*
37 碰撞
*