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上传人:小健 2021/7/16 文件大小:84 KB

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文档介绍

文档介绍:渐渗系(Introgression line)是指在杂交的基础上,通过系统回交和自交选育,获得的携带有 其它品种染色体片段的异源染色体系材料。种间渐渗系,特别是单片段的渐渗系已被证明是 研究野生种优异基因/QTL的遗传、精细定位和图位克隆的有效工具。
一方面,由于野生种与栽培种之间杂交的不亲和性等障碍,限制了野生种的直接利用,而 渐渗系与受体作物杂交亲和性高,可直接与作物进行杂交,将外源有用基因转移到栽培作物中, 进彳丁品种改良。另一方面,由于数量性状的遗传方式复杂,传统的初级分离群体很难对单个 QTL进行准确的鉴定和精细定位。而渐渗系与受体种间的基因组差异仅在渗入片段,其表型 差异均与渗入区段的基因有关,可直接将相关的QTL准确定位于染色体上,因此合理利用种间 渐渗系,可以丰富栽培种内的遗传变异、拓宽其遗传基础,同时可有效地提高来源于野生种质 优异基因/QTL精细定位的准确性,促进野生种优异基因的发掘。
渐渗系与受体种间的基因组差异仅在导入片段,因此其表型差异均与导入区段的基因有 关,不存在其它位点的上位性或互作效应,可直接将有关QTL准确定位于很窄区段的染色体上, 并易于识别微效QTLo (2)来源于野生种的渐渗系由于仅携带少数区段的野生种染色体,表型 与受体栽培种大部分一致,其育性与远缘杂交的其它群体(如F2、BCi群体等)相比大大提高, 从而可用于建立大的作图群体,实现野生优异性状基因的精细定位。(3)纯合的渐渗系作为一 个稳定的群体,可用于不同实验室间的多次研究比较,有利于相关性状分子解析的完善。
精细定位
利用渐渗系F2大群体(HH1-8- 1-2XHH1-8-57,群体数1930),采用侧翼标记(SSR26165, SSR02697, SSR06347, SSR15203)构建QIRs群体。对QIRs群体中QTL附近区段进行标记加密, 同时考察QIRs中各个QIR单株的表型,再次用该次级分离群体对目标QTL进行精细定位。
备注:QIRs; QTL等位基因重组系,从一个较大的分离群体,如F2中选取样木容量较小的了 群体进行QTL粗定位,在原始大群体中,通过分子标记选择只在初定位QTL附近分离,其它位点 均纯和一致的单株(QIR),这些单株组成的次级群体称之为QIRs。
若获得渐渗系抗、感近等基因系,将用于构建次级分离群体,用于进一步的精细定位。
基于基因组测序信息,开发更多的标记以用于GSB基因的精细定位。一但与蔓枯病抗性 相关的候选基因得到证实,将进行实验,对基因功能进行验证。
BAC文库的利用利用野生种BAC文库,通过染色体步移,构建目标区域的物理图谱。 开发新的分子标记,精细定位目标基因。具体步骤如下:利用与目标基因连锁的分子标记为探 针蹄选BAC文库,得到阳性克隆。然后对阳性克隆进行BAC末端测序,设计新的引物,直至得到 目的基因区域跨叠克隆群,构建目的基因区域的物理图谱,为进一步克隆基因奠定基础。
珍稀野生种Cucumis hytrix Chakr.(酸黄瓜,2n = 24)的重新发现很快打破了甜瓜属种间杂 交难以攻克的僵局(Chen etal, 1995 ; Chen et al, 1997)。陈劲枫等在获得甜瓜属种间杂种
F 1 ( 2n = 19 , C. hystrix与华北型黄瓜“北京截头”杂交)的