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文档介绍

文档介绍:清洗与消毒
清洗和消毒是否彻底直接关系到细胞培养的成败。掌握清洗、消毒知识,学会清洗、消毒方法是细胞培养工作的基本功。
一、 清洗
、清洗目的:去除杂物,降低带菌量
、根据洗涤对象的不同,主要分为:
器皿洗涤(包括玻璃、塑料、搪瓷、
不锈钢器皿等)
培养材料洗涤
1、玻璃用品的清洗
在细胞培养中,工作量最大的是玻璃器皿的清洗。清洗后的玻璃器皿不仅要求干净透明、无油迹,而且不能残留任何物质。某些化学物质仅百万分之一毫克,就会对细胞产生毒性作用。因此,玻璃器皿的清洗必须严格按照程序进行。
一般玻璃器皿的清洗包括:
浸泡、刷洗、浸酸和冲洗四个步骤。
(一)、器皿洗剂
① 浸泡
初次使用和培养用后的玻璃器皿都需先用清水浸泡,以使附着物软化或被溶掉。培养后的玻璃器皿多附有大量蛋白质,用完后应立即初步刷洗,浸泡在蒸馏水中,注意让水完全进入瓶皿中,不要留有气泡。使用新的器皿应先用自来水简单刷洗,然后用稀盐酸(5%)浸泡过夜或煮沸30分钟,中和其中的碱性物质后再清洗。
② 刷洗
浸泡后的玻璃器皿要用软毛刷和优质洗涤剂(加热)刷洗。
③ 浸酸
刷洗不掉的极微量杂质经过清洗液浸泡的强氧化作用可被除掉。清洗液对玻璃器皿无腐蚀作用,去污十分有效,是清洗过程中关键环节。
酸液的配制
清洗液可根据需要,配制成不同强度:常用的有下面三种:

***钾63g,浓硫酸1000ml,蒸馏水200ml 强液

***钾120g,浓硫酸200ml,蒸馏水1000ml 次强液

***钾l00g,浓硫酸l00ml,蒸馏水1000ml 弱液
①选用耐酸塑料桶或不锈钢桶配制为宜。
②先将***钾溶于水(用玻璃棒搅拌助溶,有时不能完全溶解)。
③缓缓加入浓硫酸,切忌过急,否则将产热而发生危险(绝不可将***钾倒入浓硫酸中)。
④清洁液配好呈棕红色,待变绿色时表明失效。
由于清洁液的腐蚀性极强,配制与应用时必须小 心,并做好防护。
清洁液的使用注意事项
④ 冲洗
玻璃器皿浸酸后必须用流水充分冲洗,每个器皿用流水灌满、倒掉,必须重复10次以上,不留任何残迹。最后用蒸馏水漂洗3-5次,烤干备用。
另:根据洗涤对象的具体情况可分为以下三种:
特殊洗涤
微生物大量污染的洗涤
常规洗涤