文档介绍：蛋白质溶液的浓缩方法
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目录
1
蛋白质种类和特性
2
蛋白质浓缩
3
常用浓缩方法
4
小结与展望
第二页，共35页
蛋白质的种类
第三页，共35页
蛋白质的性质
胶体性质
蛋白质的分子量在1万-100万之间，直径在1-100nm之间，属于胶体粒子。蛋白质的水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，这是因为在蛋白质颗粒表面带有很多极性基团，如NH3、COO-、OH-、SH、CONH2等和水有高度亲和性，当蛋白质与水相遇时，就很容易在蛋白质颗粒外面形成—层水膜。
***解离和等电点
蛋白质同氨基酸一样也是***电解质，在一定的pH条件下，能解离为带电基团从而使蛋白质带电。
蛋白质的变性
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蛋白质溶液的浓缩方法
蛋白质溶液的浓缩连接了蛋白质的提取和蛋白质的分离纯化，是获取高浓度或高活性蛋白质的重要步骤。
浓缩目的：提高蛋白质浓度；减少样品体积；
便于进一步纯化。
常用的浓缩方法：
沉淀法（蛋白质的沉淀性质）
吸附法（吸水剂）
冻干法（真空低温脱水）
超滤法（分子量）
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盐析法
低温有机溶剂沉淀法
等电点沉淀法
生成盐复合物沉淀法
1. 沉淀法
选择变性沉淀法
非离子多聚物沉淀法
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1. 沉淀法
沉淀法浓缩蛋白质溶液，指将蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象。
沉淀法是比较传统的分离纯化蛋白质的方法，目前仍然广泛使用。一般常用的沉淀浓缩有硫酸铵沉淀法、（低温）有机溶剂沉淀法、***沉淀法、免疫沉淀法、三***醋酸沉淀法、聚乙二醇沉淀法等。
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盐析法
定义：盐析一般指溶液中加入无机盐而使某种蛋白质溶解度降低而析出的过程。
原理：高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子，使溶液中自由水分子数减小，从而破坏蛋白质表面的水化膜，降低其溶解度，使之从溶液中沉淀出来。
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盐析法
盐类的选择：价格低；
溶解度好；
溶解过程中产热少；
盐溶液密度与沉淀的密度有明显差别。

一般来说：高价阴离子：PO43- > SO42- > Ac-和NO3-，
单价阳离子：NH4+ > K+和Na+，
高价阴离子的沉淀效果优于单价阳离子。
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盐析法
硫酸铵盐析法浓缩蛋白质溶液
硫酸铵因其价格便宜、溶解度高且对温度的敏感性低而被常用于沉淀蛋白质。

操作方法：（1）加入固体硫酸铵，适用于要求饱和度较高而不增大溶液体积的情况；
（2）加入饱和硫酸铵溶液，适用于要求饱和度不高而原来溶液体积不大的情况；
（3）透析平衡法（多用于结晶），先将盐析的样品装于透析袋中，然后浸入饱和硫酸铵中进行透析，透析袋内硫酸铵饱和度逐渐提高，达到设定浓度后目的蛋白析出。
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