文档介绍：醋酸纤维薄膜电泳法分离牛血清蛋白
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二、实验仪器
1、  牛血清
2、  醋酸纤维薄膜
3、  镊子
4、  电泳仪
5、  电泳槽
6、  盖玻片
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三、实验试剂
1、巴比妥—巴比妥钠缓冲液（离子强度，）：，溶于蒸馏水并稀释至1000ml。用pH计较正后使用。
2、 染色液：,甲醇50ml，冰乙酸10ml，蒸馏水40ml混匀即可。
3、 漂洗液：95%乙醇45ml，冰乙酸5ml和蒸馏水50ml混匀即可。
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四、试验步骤
1、准备：用镊子取薄膜一条，浸入缓冲液中，完全浸透后（大约3-5分钟），用镊子取出，将无光泽的一面向上，平放在干净滤纸上，将滤纸对折，吸取多余的缓冲液（注意不要吸的太干）。
2、点样：取盖玻片一块，用玻璃棒将血清均匀的涂在盖玻片的一端面上，直直的在薄膜一端1/3处点样。
3、电泳：将薄膜平贴于放在电泳槽上并已浸透缓冲液的滤纸上，无光泽面要向下放置，点样端放在阴极，进行电泳。电泳条件：电压90-110V，-,通电60分钟。
4、 染色：电泳完毕，将薄膜浸入染色液（回收）中10分钟，进行染色。
5、漂洗：染色完毕，将薄膜取出，放入漂洗液中漂洗至背景无色，在浸入蒸馏水中。
6、图谱观察：观察图谱，将各种血清蛋白质按实际比例大小绘于实验报告纸上。
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注意事项
请带试验的老师试验结束后，将镊子回收。
醋酸纤维薄膜在光下面能明显区分有光泽面和无光泽面。
电泳槽中间为正极，两端为负极。
染色液请用完后回收到原来的试剂瓶中。
漂洗薄膜时，请做到“少量多漂”，即用少量的漂洗液去漂洗薄膜，多漂几次，这样既不浪费漂洗液，还达到了漂洗的效果。
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实验十二 维生素C的定量测定（2，6-二***靛酚滴定法）
一、原理
维生素c又称为抗坏血酸，其还原型能还原染料2，6-二***靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。
在酸性溶液中，2，6-二***靛酚成红色，被还原后变为无色。
因此可用2，6-二***靛酚滴定样品中含有的维生素C，当样品中的维生素C被完全还原后，在滴加过量的2，6-二***靛酚，溶液变为淡红色，即为终点。
如无其他杂质干扰，则样品液所还原的2，6-二***靛酚的量与样品中所含有维生素C的量成正比。
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二、实验仪器
新鲜水果
吸管
容量瓶
滴定装置
锥形瓶
研钵
漏斗
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三、实验试剂
1、2%草酸溶液：草酸2g，溶于100ml蒸馏水。
2、1%草酸溶液：草酸1g，溶于100ml蒸馏水。
3、标准维生素C液：，溶于1%草酸溶液，并稀释至100ml，贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用时配制。.
4、%2，6-二***靛酚溶液：称取500mg2，6-二***靛酚溶于300ml含有104mg碳酸氢钠的热水中，冷却，加蒸馏水并稀释至500ml，滤去不溶物，贮于棕色瓶中，冷藏。
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四、实验步骤
：
将水果用水洗干净，用滤纸吸取表面水分。
，加2%草酸试剂10ml置研钵中研成浆状。
直接将浆状物，倒入50ml容量瓶中，用2%草酸溶液稀释并定容，混匀，静止10分钟，过滤（最初数毫升滤液弃去），滤液备用。
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1) 标准液的滴定：，加9ml1%草酸溶液，用2，6-二***靛酚滴定至淡红色。滴定终点要保持15秒钟。有所用2，6-二***靛酚的体积算出1ml染料相当于多少毫克抗坏血酸。
2) 样品液的滴定：准确吸取滤液两份，每份10ml，分别放入两个100ml锥形瓶中，滴定方法同上。（ 2，6-二***靛酚用完后，请回收回原来的试剂瓶中）
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