文档介绍：蛋白质溶液的浓缩方法
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目录
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蛋白质种类和特性
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蛋白质浓缩
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常用浓缩方法
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小结与展望
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蛋白质的种类
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蛋白质的性质
胶体性质
低温有机溶剂沉淀法
优缺点：
优点：（1）分辨力高于盐析法，即蛋白质只在一个比较窄的有机溶剂浓度下沉淀；
（2）沉淀不用脱盐，过滤更为容易。

缺点：容易使蛋白质变性失活，操作要求在低温下进行。如利用***沉淀蛋白质时，必须在0~4℃低温下进行。蛋白质被***沉淀后，应立即分离，否则蛋白质会变性。
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等电点沉淀法
原理：***电解质分子上的净电荷为零时溶解度最低。
适用范围：只适用于水化程度不大、在等电点时溶解度很低的蛋白质，如酪蛋白。对于亲水性很强的蛋白质，在等电点附近仍然有很大的溶解度，用等电点法沉淀不完全。
等电点法常与盐析法、有机溶剂沉淀法或其他沉淀方法联合使用，以提高其沉淀能力。
优缺点：
优点：很多蛋白质的等电点在偏酸性范围内，调节pH时所需要的无机酸价格低，操作也比较方便。
缺点：对低pH敏感的蛋白应避免使用此法。
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生成盐复合物沉淀法
蛋白质可生成盐类复合物沉淀，主要方法：
（l）与酸性功能团作用的金属复合盐法（如铜盐、银盐、锌盐、铅盐、锂盐、钙盐等），沉淀可通以H2S使金属变成硫化物而除去；
（2）与碱性功能团作用的有机复合盐法（如苦味酸盐、苦***酸盐、丹宁酸盐等），沉淀加入无机酸并用乙酸萃取，或用离子交换法除去。
（3）无机复合盐法（如磷钨酸盐、磷钼酸盐等）。

但值得注意的是，重金属、某些有机酸与无机酸和蛋白质形成复合盐后，常使蛋白质发生不可逆的沉淀，应用时必须谨慎。
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选择变性沉淀法
原理：利用蛋白质对某些物理或化学因素的敏感性不同，有选择地使之变性沉淀，以达到分离提纯的目的。
方法：
（1）利用表面活性剂（三***乙酸）或有机溶剂；
（2）利用生物大分子的热不稳定性，加热破坏某些组分，而保存另一些组分；
（3）酸碱变性沉淀。，只有少数蛋白质在中性或碱性条件下形成沉淀，且可以通过调节pH来去除杂蛋白。
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非离子多聚物沉淀法
背景：非离子多聚物是六十年代发展起来的一类重要沉淀剂，最早用于提纯免疫球蛋白、沉淀一些细菌和病毒，近年来逐渐广泛应用于核酸和酶的分离提纯。
包括不同分子量的PEG（常用PEG-6000）、NPEO、葡聚糖、右旋糖酐硫酸钠等。
方法：（1）基于不同蛋白质的表面结构不同，分配系数不同，可选用两种水溶性非离子多聚物组成液/液两相体系，不等量分配而分离沉淀。
（2）选用一种水溶性非离子多聚物，使蛋白质在同一液相中，由于分子相互排斥而凝聚导致蛋白析出。该方法操作时先离心除去大悬浮颗粒，调整溶液PH值和温度至适度，然后加入中性盐和多聚物至一定浓度，冷贮一段时间，即形成沉淀。
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透析袋吸附法
凝胶吸附法
2. 吸附法
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吸附法
定义：通过吸附剂直接去除溶液中的水分子以达到浓缩蛋白质溶液的目的。
吸附法是最简单快速的浓缩蛋白质溶液的方法，所需仪器简单，特别适用于稳定性较差的蛋白质。
吸附剂的选择：
（1）吸附剂不能与溶液发生化学反应；
（2）吸附剂对蛋白质不吸附；
（3）吸附剂易于溶液分开。
常用的吸附剂：PEG、聚乙烯吡咯***、蔗糖、凝胶等。
常用的吸附方法：透析袋法和凝胶浓缩法。
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透析袋吸附法
透析袋吸附法在透析技术的基础上改良而来的。
传统的透析是基于分子质量大小的液相分离技术，它由透过半透膜的选择性扩散来实现。但是纯粹的透析主要用于除去小分子类的溶质，而要达到浓缩（即除去溶剂）的目的则费时较长。
透析袋吸附法是将透析液换成可以吸水的溶液或者固体吸附剂，这样可实现很好的浓缩作用。
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透析袋吸附法
具体操作：
将蛋白质溶液加入到透析袋中（无透析袋可以用玻璃纸代替），结扎好后将PEG、蔗糖等吸附剂撒在透析袋外；或者把吸水剂配成30%-40%的溶液，将装有蛋白质溶液的透析袋放入吸附剂溶液中。吸水剂用过后，可放入温箱中烘干或自然干燥后重复利用。
优缺点：
优点：该方法简单高效，操作过程中可以保持蛋白质不变性，吸附剂可回收利用。
缺点：蛋白质可能吸附在透析膜上，导致回收率低。操作过程需要低温。
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凝胶吸附法
定义：凝胶是一种惰性多孔聚合物，孔径较小的凝胶具