文档介绍：第1章 微生物的遗传物质
第一节 证明遗传物质是DNA(或RNA)的经典实验
第二节 DNA的结构和复制
第三节 原核生物的染色体及其复制
第四节 真核生物染色体及其复制
第五节 基因结构和基因组
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第一节 证明遗传
Replisome
DNA复制起始控制机理知之甚少
复制的准确性
（修复，校正）
研究试材的特殊性
（温度敏感型ts，突变抑制体系Su）
DNA复制速度
( 105 bp/min ，高速解旋 112 km/h ?)
缺乏统一的模式
(. DNA, . DNA, Linear DNA….)
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原核生物的复制起点（Origin of replication ，简称ori）例如， 的oriC，长度为245bp
真核生物多个复制起点，例如酿酒酵母，约有400个复制起点（autonomously replicatory sequence，ARS），每个长度为100-200bp。
2. 复制起点与方向（replication origin & direction ）
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isolation of ori
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rich AT & palindrom
Enzymes binding site
300 bp ±
in replication origin
0f Prokaryote
AT rich
复制起点的特征
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AT rich
真核生物复制起点的研究是以酵母为基础的
ARS (automatic Replication Sequence) 自主复制序列
ARS1 (A, B1,B2,B3) A区具有高度保守性
A/TTTTATG/ATTTA/T
B区变化较大
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“呼吸现象”
DNA复制原点处氢键迅速断裂与再生，
导致两条DNA链不断解链与聚合，
形成瞬间的单泡状结构的过程。
在富含AT的区域内尤为明显
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子链DNA延伸方向
DNA polymerase reacts on the 3’ end only
New DNA elongation from 5’ to 3’ direction
进化中保留
的深刻的、
选择与适应
的、化学及
功能的根源
5’ OH
T C A
T C A C
5’ OH 3’
ppp OH
C
+
+ ppi
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如果DNA的延伸方向是 3’ → 5’
A T C G
+
5’ ppp OH 3’
G
ppp OH
G A T C G
5’ ppp OH 3’
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A T C G
+
5’ ppp OH 3’
G
ppp OH
G
5’ ppp
因能量的需要，
DNA的5’ 端必须带有PPP
游离dNTP具有ppp
ppp OH 3’
A T C G
Nacl 的生理环境中，磷酸基团间的强电负性，使dNTP难以聚合到
DNA的5‘端，而且 双链DNA的5’端碱基配对困难 需要其他机制以解脱
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碱基发生错配后的校正……
费时、费能、增加脱磷酸、加磷酸的能量消耗
A T C G
ppp OH
+
ppp
A
p OH
T C G
pp
p OH
T C G
T C G
pp p OH
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3. DNA的半保留复制
（Semi-Conservation Replication）
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Three replication hypotheses
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(CsCl