文档介绍：26南善姬
研究结果
（一）临床结果
根据CJD的诊断标准，4例病人均诊断为肯定CJD。
（二）实验结果
病理检查结果：
大体观察：
大脑皮层 不同程度的海绵状变性
白质 类似改变 程度较轻
镜下观察JD病例的10-15%，呈显性特征遗传。朊蛋白基因突变是遗传性CJD的发病原因。
可疑CJD病例的朊蛋白基因检测
与疾病相关的突变
诊断遗传性CJD
文献已报道10余种朊蛋白基因突变与朊蛋白病的发病有关，如P102L、P105L、A117V、D178N、V180I、T183A、F198S、E200K、R208H、V210I、Q217R、M232R和2-9个8肽重复序列插入等。
目前，国内尚无克-雅氏病患者朊蛋白基因突变的报道，我们研究了12例克-雅氏病患者朊蛋白基因突变情况，探讨了中国遗传性CJD存在的特殊突变。
研究结果
(一)朊蛋白基因外显子的扩增与序列测定
4例肯定克-雅氏病例中
3例朊蛋白基因检测未见异常；
1例朊蛋白基因729 G→C
第211个氨基酸 谷氨酸→天冬氨酸 （E211Q）
朊蛋白基因外显子序列测序结果 ↑：朊蛋白基因第729碱基G被C取代
8例可能克-雅氏病患者中，
2例朊蛋白基因 751G→A
第219个氨基酸 谷氨酸→赖氨酸 （E219K）
1例朊蛋白基因 第256-第279碱基丢失
第54-第61个氨基酸缺失
图12 朊蛋白基因外显子序列测序结果 ↑：朊蛋白基因第751碱基G被A取代（751G→A）
朊蛋白基因外显子序列测定 ↑： 240相当于朊蛋白基因第255位碱基；241相当于朊蛋白基因第280位碱基；朊蛋白基因第256和第279碱基缺失
(二)限制性内切酶分析朊蛋白基因129位点、178位点密码子基因型
12例CJD病人:
129密码子基因型
1例 甲硫氨酸/缬氨酸
11例 甲硫氨酸/甲硫氨酸
178密码子基因型
均为天冬氨酸/天冬氨酸
讨 论
朊蛋白是位于神经细胞表面的一种糖蛋白，由第20号染色体短臂上的朊蛋白基因编码，共有253个氨基酸组成。N端除了信号肽负责蛋白外泌，还有5个八肽重复序列（octarepeat），可结合一定数量的铜离子，与朊蛋白构象转变密切相关。
本研究通过对12例克-雅氏病患者朊蛋白基因检测发现：
4例肯定克-雅氏病患者
3例肯定克-雅氏病患者的朊蛋白基因未见异常
1例肯定克-雅氏病患者的朊蛋白基因729G→C，第211个氨基酸谷氨酸→天冬氨酸（E211Q）,是朊蛋白基因一种非常罕见的点突变。
2001年，Ladogana A 在一个患有遗传性克-雅氏病的家族中检测到：
朊蛋白第211个氨基酸的密码子
GAG
↓
CAG
谷氨酸E
↓
谷氨酰***Q
认为E211Q是一种罕见的导致遗传性克-雅氏病发生的基因突变。
本研究的发现与他们的发现又有所不同
朊蛋白第211个氨基酸的密码子
GAG
↓
GAC
谷氨酸E
↓
天冬氨酸D
朊蛋白基因突变E211D在国外从未被报道，在国内也是首次。
两者的差异可能来自东西方人种遗传背景的差异；
也可能E211D和E211Q是完全互不相干的两种罕见致病朊蛋白基因突变，与人种无关，只不过西方暂时未发现E211D，东方也暂时未发现E211Q。
进一步研究需要更多类似病例的发现。
8例可能克-雅氏病患者
2例朊蛋白基因751G→A 第219个氨基酸谷氨酸→赖氨酸（E219K）。
1例可能CJD患者的朊蛋白基因存在24bp缺失。
基因多态性
一种少见的多态性
朊蛋白基因24bp缺失也许不仅仅是一种少见的多态性，极有可能是对朊蛋白病敏感的基因型。
第三部分 2例很可能CJD病人脑组织 蛋白质组学研究
蛋白质组学是对基因组编码的所有蛋白质，即蛋白质组进行研究的一门科学，可以在蛋白质水平上阐述生理、病理过程的发生机制，为疾病诊断、治疗提供依据。
国外有一些关于克-雅氏病蛋白质组学方面的研究，多数为CJD脑脊液蛋白质组学的研究。很少有CJD脑组织蛋白质组学的报道。
我们收集了2例很可能CJD病例和2例脑外伤手术病例，对他们脑组织蛋白质表达种类和数量进行了比较研究，希望能找到对CJD诊断有意义的蛋白质。
材料与方法
1、病人来源：课题组1997-2004年间收集的2例很可能CJD病人；
2、正常对照：2例脑外伤手术病人。
蛋白质组学实验流程