文档介绍：紫外-可见分光光度法讲议
第一节紫外-可见分光光度法
研究物质在紫外光、可见光光区的分子吸收光谱的分析方法称为紫外-可见分光光度法。
紫外—可见分光光度法是利用某些物质的分子吸收在200 ~ 800 nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法,广泛用于无机和有机物质的定性和定量测定。
第二节光吸收基本定律和吸收系数
:
比尔—郎伯(Beer—Lambert)定律为光吸收基本定律,是分光光度分析的理论基础。 Lambert于1730年提出了光强度与吸收介质厚度的关系。1852年Beer提出了光强度与吸收介质中吸光物质浓度之间的关系。
透光率:
单色光通过一物质的溶液时透过光的强度(I)与入射光的强度(I0)之比称为透光率或透射比(T)。
T = I / I0
吸收度:
透光率的负对数称为吸收度或光密度。
A=log1/T=-logT
郎伯(Lambert)定律:
当溶液浓度不变时,吸收度与溶液的液层厚度成正比。
比尔(Beer)定律:
当溶液液层厚度不变时,吸收度与溶液的浓度成正比。
郎伯—比尔(Lambert— Beer )定律:
单色光通过一物质的溶液时,如果入射光的强度不变,溶液吸收度(A)与溶液浓度(C)和液层厚度(L)成正比。
A=log1/T=ECL
式中E为吸收系数
:
定义:吸光物质在单位浓度和单位液层厚度时的吸收度。
表示方法:
(1)百分吸收系数(E):
当溶液浓度(C)为1%(g/ml),光路长度(L)为1cm时,相应的吸收度为百分吸收系数,以E表示。
E=A/C(%)×L(cm)
中国药典规定的吸收系数即为E。
(2)摩尔吸收系数(ε):
当溶液的浓度(C)为1mol/L,光路长度(L)为1cm时,相应的吸收系数为摩尔吸收系数,以ε表示。
ε=A/C(mol/L)×L(cm)
ε和E的关系是:
ε=E×分子量/10
E= ε×10/分子量
基本原理框图:
光源
单色器
吸收池
检测器
讯号处理
及显示器
(一)光源
可见光区,常用钨灯做为光源,可使用的范围在340 ~ 2500nm。
紫外光区,常用氢灯或氘灯做为光源。可使用的范围在160 ~ 375 nm。
仪器必须配有稳压装置。