文档介绍：第二章 DNA克隆技术
本章,我们讨论4个问题:
1. 什么是DNA克隆技术——DNA克隆技术的概念。
2. 为什么能进行DNA克隆技术——DNA克隆技术的原理和技术路线。
——DNA克隆技术的步骤(DNA体外重组,重组DNA导入宿主细胞后扩增和表达,基因工程后处理)
4. DNA克隆技术的应用和前景——对于医学来说即生产基因工程产品、开展基因治疗等。
DNA重组/ 基因重组
利用酶学方法,将不同来源的DNA分子(目的DNA分子和载体)在体外进行特异切割、重新连接,组装成一个新的DNA分子。
DNA克隆/ 基因克隆/ 分子克隆
将重组的DNA通过一定方式导入宿主细胞内,并且在宿主细胞中进行复制扩增,形成大量与亲代分子完全相同的子代DNA分子的过程。
克隆的含义
DNA克隆: 分子水平
细胞克隆: 细胞水平
克隆羊: 无性繁殖个体水平
(一)基因(gene)
基因从化学上来说,指的是一段DNA或RNA顺序,该顺序可以产生或影响某种表型(genotype,phenotype),从遗传学上来说,基因代表一个遗传单位,一个功能单位,一个突变单位。
(二)基因工程(ic engineering)
基因工程有目的的通过分子克隆技术,人为操作改造基因,改变生物的遗传性状的系列过程,总称为基因工程。
第一节概论
一、历史
1944 肺炎双球菌转化实验证实DNA是遗传物质
1953 DNA双螺旋模型
1960’s 遗传密码、中心法则
1970 反转录酶
1946 质粒
1968-70 限制酶
1972 不同来源的DN***段体外连接成重组DNA分子
1973 转化、筛选重组质粒的阳性克隆
The transforming principle is DNA.
DNA is the ic material
肺炎双球菌转化实验
The Double Helix (1953)
The foundation of molecular biology
Francis H. Crick
James D. Watson