文档介绍：1
第三章离心技术及仪器
centrifugal technique and centrifuge
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经典的分离分析技术:
离心技术、电泳技术、光谱技术、色谱技术
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离心现象是指物体在离心力场中表现的沉降运动现象。应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为离心技术(centrifugal technique),实现离心技术的仪器是离心机(centrifuge)。
前言
概念:
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离心技术的应用:
主要用于各种生物样品的分离、纯化和制备
低速离心机主要用于细胞、细胞核、细胞膜、细菌的沉淀和收集;
高速离心机多用于制备和收集微生物、细胞碎片、大的细胞器、硫酸铵沉淀物以及免疫沉淀物等;
超速离心机已成为分离、提纯、鉴定、分析线粒体、微粒体、染色体、溶酶体、质粒、病毒、大分子核酸和高分子蛋白质
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第一节离心技术原理
第二节离心机结构
第三节离心方法
第四节高、超速离心技术
主要内容
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教学基本要求
,常用的离心方法.
,各种离心机的临床应用
、离心方法的进展
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一、离心力
二、相对离心力
三、沉降系数
四、沉降速度
第一节离心技术原理
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重力
时间
当悬浮液静置不动时,由于重力场的作用可使得其中悬浮的颗粒逐渐下沉,下沉的速度与微粒的大小、形态、密度、重力场的强度及液体的黏度有关。如红细胞颗粒,直径为数微米,可以在通常重力作用下观察到它们的沉降过程。此外,物质在介质中沉降时还伴随有扩散现象。
重力沉降:
混合液
静置一段时间后
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扩散现象
扩散是由于微粒的热运动而产生的质量迁移现象,主要是由于密度差引起的。对小于几微米的微粒如病毒或蛋白质等,它们在溶液中成胶体或半胶体状态,仅仅利用重力是不可能观察到沉降过程的,因为颗粒越小,与溶液密度越相近,扩散现象则越严重,而沉降越慢。
扩散现象是不利于样品分离的,如果加大重力,就可能克服扩散现象的不利影响,实现生物大分子的分离。