文档介绍：超高效液相色谱-质谱/质谱联用法测定人血浆中的辛伐他汀
王东,秦峰,,2008,26(3):327-330.
第十组
辛伐他汀及其特点
辛伐他汀(simvastatin)是一种新型的调血脂药,临床上主要用于治疗原发性胆固醇血症
辛伐他汀为前体药物,因此测定其血药浓度较血中含量低,因此测定其血药浓度比较困难
本实验方法利用了UPLC-MS/MS(超高效液相色谱-串联质谱)法测定人血浆中的辛伐他汀的方法,该法灵敏度高,分析速度快,操作简便,适于需高通量分析的药物动力学及生物等效性研究。
实验思路
标准曲线的制备
准确度和精密度
方法的专属性
检验基质效应
提取回收率和稳定性
应用于药动学研究
仪器
美国Waters公司ACQUITY Ultra Performance LCTM超高效液相色谱仪;
美国Waters公司Waters Quattro micro API三重四极杆串联质谱仪,配备电喷雾离子源(ESI)和Masslynx4·1数据采集软件。
试剂
辛伐他汀标准对照品
洛伐他汀标准对照品
乙***为色谱纯,购自TEDIA公司
***、正己烷、异丙醇均为分析纯
空白血浆
色谱条件
色谱柱:ACQUITY UPLCTMBEH C18柱(50mm×2·1mm,1·7μm,美国Waters公司),流动相:乙***-10mmol/L乙酸铵水溶液(体积比为85∶15),流速:0·25mL/m in,柱温:40℃,进样量:20μL
质谱条件
离子源: ESI
正离子检测模式
扫描方式:多反应监测(MRM)
定量分析时的离子反应为m/z419·2→m /z199·0(辛伐他汀)和m /z405·0→m /z199·0(内标洛伐他汀)
扫描时间为0·10s
毛细管电压:3·0kV 锥孔电压:20V
去溶剂气:氮气,温度:350℃,流速:500L/h
源温度:110℃
碰撞诱导解离电压:15eV
配制不同浓度的辛伐他汀标准溶液
处理后进质谱
绘制标准曲线,计算直线回归方程
辛伐他汀及质谱分析图
一级全扫描质谱图中获得辛伐他汀准分子离子峰[M+H]+m /z419·2,选择性对[M+H]+进行二级质谱分析,准分子离子裂解生成的主要碎片离子为m /z199·0,用于定量分析