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4质粒DNA的提取纯化与鉴定.ppt

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4质粒DNA的提取纯化与鉴定.ppt

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一、基因克隆的质粒载体
1、定义
双链闭环DNA;
1kb--200kb;
独立存在于宿主染色体之外;
具复制起始点;
复制和转录不同程度依赖于宿主基因;
编码某些酶,使宿主具有特殊标志,
可供选择。
2、载体性质
(1).复制能力;
(2).容纳外源DNA的能力;
(3).选择标记:抗生素耐受。
(4).引入多克隆位点;
(5).引入重组选择标记。
3、载体分类:
按功能分
按宿主性质
:质粒载体、粘粒、噬
菌粒、 λ噬菌体、噬菌体M13等
:逆转录病毒、腺病毒、
昆虫杆状病毒

4、常用质粒载体
例如:1. pBR322、pUC 18/19、
pUC118/119、pGEM、
pBluescript、
pBluescript SK/KS等
2. pET、pGEMEX、pGEX等
3. pALTER等
5、常用质粒宿主:
HB101、DH5α、TG1、JM系列等
BL21(DE3)等
质粒的电泳图谱
Thank you