医学微生物与免疫学实验2.pptx

文档介绍：实验二:小鼠血液标本的采集及血清分离
采集方法
鼠尾采血——当所需血量很少时采用本法。固定小鼠并露出鼠尾,将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45-50℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)-,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。
断头取血——当需要较大量的血液,而又不继续保存动物生命的采血方法。左手握住动物,右手持剪刀,快速剪掉头颈部,倒立动物让血液滴入容器。需注意防止断毛落入容器中。
眼眶静脉丛采血——当需用中等量的血液,而又避免动物死亡时采用的方法。采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠的颈部,应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1mL注射器,使采血器与鼠面成45 º的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入深度,小鼠约2-3mm,大鼠约4-5mm。
鼠尾采血
断头取血
眼眶静脉丛采血
实验三:胶体金方法检测
人血清表面抗体水平
胶体金诊断是采用胶体金免疫层析技术研制而成,该技术是90年代初在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术,最先用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定和乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)等检测。
简介及原理
以硝酸纤维素膜为载体,利用了微孔膜的毛细血管作用,滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移,通过抗原抗体结合,并利用胶体金呈现颜色(红色)反应,检测抗原/抗体。试纸被滴加样品溶液后,溶液中的抗原随溶液爬行至结合垫处,与其中的胶体金标记抗体1反应形成红色的抗原抗体复合物,然后继续层析移动向前。在观察窗口的检测线(T)处,红色免疫复合物中的抗原被此处预先包被抗体2捕获并截留下来,随着红色复合物截留量增多,逐渐形成一条红线,因此根据红色T线的出现即可判定样品溶液为阳性。如果样品中没有抗原,则不形成免疫抗原抗体复合物,流过T处,不发生捕获截留,T处保持白色,判定为阴性。
实验方法与步骤
150μl
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150μl血清
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PBS
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