23免疫学检测24免疫学预防.ppt

文档介绍：免疫学检测技术
主要内容
第一节免疫细胞及其亚群的检测(自学)
第二节免疫分子的检测(重点)
一、抗原、抗体的检测
(一)抗原- 抗体反应的特点(自学)
(二)抗原- 抗体反应的影响因素(自学)
(三)抗原- 抗体反应的类型和检测方法(重点)
(自学)
(自学)
(自学)
(重点)
(自学)
二、细胞因子的检测(自学)
第三节免疫学检测的临床应用
第二节免疫分子的检测
(三)抗原抗体反应的类型和检测方法

(1)免疫荧光技术
(3)放射免疫测定法
(2)酶免疫测定法
……….
Ag-Ab + 标记技术。用以检测Ag或Ab的一种试验方法。
标记:荧光素、酶、放射性同位素等。标记后的Ag或Ab仍有原有的生物学活性。
特点:敏感性高、特异性强、应用范围广,可定性、定量、定位。
4、免疫标记技术
免疫荧光技术
免疫酶测定法
放射免疫测定法
发光免疫分析
免疫胶体金技术
免疫印迹技术
Ag
荧光素
Ag
放射性同位素
酶
荧光显微镜
酶标检测仪
射线测量仪
化学发光物、金属颗粒等
用荧光素、放射性同位素、酶、金属颗粒及化学(或生物)发光剂等作为追踪物,标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应
免疫标记技术
Ag
硝酸纤维素膜和醋酸纤维素膜
利用吸附载体作为固相进行抗原抗体反应
吸附载体
聚苯乙烯微量反应板(酶标板)
Ag
聚苯乙烯微量反应板(酶标板)
封阻/封闭(block)
包被(coat)
Ag
Ag
荧光素:
异硫氰酸荧光素(FITC)---------黄绿色荧光
四乙基罗丹明(RB200)-----------橙色荧光
四甲基异硫氰酸罗丹明(TMRITC)--橙红色
待检标本(固定在玻片上)+已知荧光抗体→洗去游离的荧光Ab
→干燥后,荧光显微镜下观察。
用途:病毒感染的细胞、携带某种特异性Ag的细胞的检测。
a、直接荧光法
问题思考:
直接法会给我们的检测工作带来什么不方面?
检测多种Ag需制备多种相应的荧光抗体标记。
用来检测标本中未知的Ag。
检测Ag。未标记Ab+待检Ag(未知)→(冲洗)+荧光标
记抗Ab→冲洗、干燥、荧光显微镜下观察。
b、间接荧光法
优点:敏感性高,制备一种荧光标记抗Ab即可对多种Ab-Ab系统进行检测。
缺点:易出现非特异性荧光。