文档介绍：酶联免疫吸附反应( ELISA ) Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay
一、ELISA简介
二、ELISA原理
三、ELISA分类
四、ELISA相关试剂
五、ELISA影响因素
六、ELISA应用
一、ELISA简介
1971年瑞典学者 Engvall和Perlmann,荷兰学者Van Weeman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,称为酶联免疫吸附实验(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,ELISA)。
自上世纪70年代初问世以来, ELISA发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。
二、ELISA原理
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的
量直接相关,故可根据呈色的深浅进行
定性或定量分析。
抗体
动物机体受到抗原物质刺激后,由B淋巴细胞转化为浆细胞产生的,能与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白,这类免疫球蛋白称为抗体(antibody,Ab)。
免疫球蛋白是蛋白质,因此一种动物的免疫球蛋白对另一种动物而言是良好的抗原。免疫球蛋白不仅在异种动物之间具有抗原性,而且在同一种属动物不同个体之间,以及自身体内同样是一种抗原物质。
免疫标记技术
放射物标记技术
酶标技术
免疫荧光技术
其他标记技术
酶联免疫吸附技术
酶免疫组化技术
双抗体夹心法
竞争法
双抗原夹心法
间接法
三、ELISA分类
双抗体夹心法
竞争法