文档介绍：第四章 药物定量分析与分析方法验证
二、光谱分析法
(一)紫外-可见分光光度法(200nm--760nm)
1. 特点
灵敏度高,可达10-4g/ml--10-7g/ml
准确度高,RSD(%)为2%--5%
仪器价格低廉操作简单,易普及,应用广
2. 定量:朗伯-比耳定律 A = E1%1cmCL
3. 仪器校正和检定
波长校正:用***, , , , , , , , , 。
***灯谱线
吸收度的检定:用K2CrO7(60mg)+ H2SO4液至1000ml
波长(nm) 235(最小) 257(最大) 313(最小) 350(最大)
E1%1cm
- - - -
杂散光检查: 试剂浓度(g/ml) 测定波长透光率(%)
NaI 220nm <
NaNO2 340nm <
4. 对溶剂的要求:
220~240nm 241~250nm 251~300nm 300nm以上
溶剂+吸收池A < < < <
5. 测定方法
~,狭缝宽度为半峰宽的1/10
常用方法
对照品比较法:Cx=(Ax/Ar)Cr; 含量%=Cx × D/W × 100 %
吸收系数法: Cx=Ax / (E1%1cm)x × 100;含量%=[ Ax / (E1%1cm )x] × 100 × D/W × 100 %
计算分光光度法:VA的三点校正法
比色法:加入相应的显色试剂
定量计算方法:
(1)对照品比较法
(2)吸收系数法
(二)荧光分光光度法
1. 特点
灵敏度高,可达10-10g/ml--10-12g/ml
在低浓度进行测定,防止F与C不成正比及自熄灭作用
用基准物溶液校正仪器灵敏度,防止样品液荧光衰减
灵敏度高,但干扰因素多
制备荧光衍生物,可提高其灵敏度和选择性
用样品量少
—激发单色光器与发射单色光器;且激发光源、样品池和检测器成直角。
含量测定常用的方法对照品比较法:Ci = (Ri-Rib)/(Rr-Rrb)×Cr
***片、利血平片、洋地黄毒苷片。
(三)色谱分析法
按分离原理分为:吸附;分配;离子交换;排阻色谱
方法分类
按分离方法分为:PC;TLC;柱色谱;GC,HPLC。
(一)HPLC法
1. 对HPLC仪器一般要求色谱柱、流动相按品种项下要求。
色谱柱的理论板数:n = (tR /Wh/2)2
分离度:R = 2(tR1 – tR2)/(W1 + W2);
重复性:RSD≤2%
拖尾因子:T = ~
2. 系统适用性试验