文档介绍：大蒜多糖中单糖组分的毛细管电泳研究
作者:马晓丽,孟磊,孙莲,李新霞,吕成军
【摘要】 目的建立高效毛细管电泳法分恨析大蒜多糖中的单糖组成及摩尔比。方法亦大蒜多糖样品经2mol/L硫酸降解为锊单糖后,经1-苯基-3-***-5-吡莆唑啉***(PMP)衍生化,用毛细管区带电泳(CZE)法测定单糖组成。结果大蒜多糖中葡萄糖、半乳糖醛酸、鼠李糖、倒甘露糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸、半乳糖诡的摩尔比为∶∶∶∶∶∶。结论该方法灵螂敏度高,结果准确可靠,可用于大蒜多糖唳的单糖组成测定及质量控制。
【关键词铹】 大蒜多糖;衍生化;1-苯基-3-铅***-5-吡唑啉***;毛细管电泳法
大蒜(Alliumsativum)营养孪丰富,是日常生活中常用的香辛蔬菜和调吏味佳品,而且具有很强的防病治病保健功樵能[1]。大蒜多糖为大蒜中一类含量较芭高的活性组分,药理研究证明大蒜多糖具标有抗氧化、抗病毒、保护心肌、防止心肌弼纤维化等多种重要的生物活性[2,3]蜀,虽然大量文献报道了大蒜多糖的提取分溜离及药理作用,但关于大蒜多糖的单糖组怙分研究未见报道。
高效毛细管电泳法[混4,5]是近年发展起来的一种具有高效
鸸、灵敏和低耗的分析方法,已引起药物分瞧析界的广泛重视。本实验首次采用柱前衍把生化方法,用毛细管电泳法研究大蒜多糖耢的单糖组成,以期为大蒜资源的开发和利辰用提供基础依据。
1 仪器与试药
B谫eckmanP/ACETMMDQ型高浴效毛细管电泳仪,二极管阵列检测器,石璩英毛细管柱;FE20-pH计;XS2闵05电子天平。
葡萄糖(glucos瑚e)、甘露糖(mannose)、半乳屺糖(galactose)、鼠李糖(r蚝hamnose)、阿拉伯糖(arab焦onose)(分析纯,上海试剂二厂)谛;葡萄糖醛酸(glucuronic)抄和半乳糖醛酸(galacturoni羸cacid,分析纯,Sigma公司);大蒜多糖由新疆埃乐欣药业分离纯化。雨
1-苯基-3-***-5-吡唑啉***(诛PMP);乙***,甲醇,色谱纯;硫酸,轵盐酸,氢氧化钠(分析纯,西安化学试剂囱厂);水为去离子水。
2 方法与结果Ш
电泳条件石英毛细管柱;运行缓冲液:抛75mmol·L-1硼砂溶液;柱温2译5℃;电压:15kV;压力进样Pa×舍20s;检测波长245nm。清洗程序:第1次进样前分别以甲醇、双蒸水、mEol/L盐酸、双蒸水、mol/LNa嵌OH、双蒸水、缓冲溶液冲洗毛细管20
儋psi×3min;每变换1次电泳缓冲液,均用缓冲液平衡至电流平稳(10m是in)后才能进样测量。样品及缓冲液均也在4℃储存,在使用前用μm微孔滤膜滤茧过,且临用前超声脱气处理。
多糖的水解精确称取大蒜多糖mg,置于10ml街具塞试管内,加入2mol·L-1的H蛟2SO4溶液ml,于100℃水浴中水撖解8h,得水解样品溶液。用4mol·惦L-1氢氧化钠水溶液中和至pH,并以绒纯化水稀释到ml,离心,吸取上清液,逑得多糖水解样品。
 衍生物的制备
标秩准单糖混合液的配制分别精密称取甘露糖8g及半乳糖6g,鼠李糖6g,葡萄糖镜9g,葡萄糖醛酸9g,半乳糖醛酸2g西,阿拉伯糖0g,置10ml量瓶中,加楹水溶解并定容至刻度,摇匀,即得。
标肘准单糖混合液的衍生精密吸取单糖混合液Γ50μl,于具塞试管中,