文档介绍：青藤碱对细胞免疫功能的影响
岑国栋1 钟振东2 高永翔1(通讯作者)
(1成都中医药大学 610075;2四川省医学科学院 610072)
【摘要】目的研究青藤碱对正常小鼠细胞免疫功能的影响。方法通过先进的流式细胞仪技术及T淋巴细胞增殖试验,分别测定青藤碱对正常小鼠外周血T细胞亚群及T淋巴细胞增殖能力的影响。结果与空白对照组比较,青藤碱可显著降低成熟淋巴细胞(CD3+)﹑T辅助性及T诱导性细胞亚群(CD4+)百分比值和T淋巴细胞增殖能力,也可显著升高T抑制细胞亚群(CD8+)百分比值。结论青藤碱具有一定的细胞免疫抑制作用。
【关键词】青藤碱淋巴细胞 T淋巴细胞增殖试验 CD3+ CD4+ CD8+
【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2013)21-0014-01
近年的对青藤碱的研究多是从体外细胞免疫进行研究或者仅进行体内体液免疫的探讨,系统地对整体动物的细胞免疫抑制的研究报道几乎没有。本研究旨在通过先进的流式细胞技术及T淋巴细胞增殖试验,探讨青藤碱对正常小鼠细胞免疫的作用,为临床用药提供依据。
1 材料及方法
试验药物
青藤碱肠溶片,批号:20020210,湖南华纳大药厂有限公司;规格:含盐酸青风藤碱20mg/片,依据临床用量为每天4mg/kg;按人与小鼠体表面积等效换算比值计算,选择小鼠剂量32mg/kg,约等效于临床***日用剂量,故青藤碱设置高剂量为(32mg/kg);中剂量(64mg/kg);低剂量(128mg/kg),将青藤碱肠溶片研成粉末,配制成溶液灌胃。
阳性药:地塞米松,,批号:020305,浙江仙琚制药股份有限公司;依据临床用量为3mg/天;按人与小鼠体表面积等效换算比值计算,选择
小鼠剂量为400ug/kg,约等效于临床***用量。
动物
BALB/c小鼠,体重18±2g左右,雌雄各半,由河南医科大学实验动物中心提供,动物合格证号:4104035。
试剂
大鼠抗小鼠T细胞表面标记单克隆抗体(抗CD3﹑抗CD4﹑抗CD8),购于steroetc公司;ConA,批号:02k0711,购自sigma公司;MTT,批号:095k1270,购自sigma公司。
仪器
BECKMAN流式细胞分析仪器﹑全自动多功能酶标仪MK3﹑SV3-2B移液器等。
方法
测定对正常小鼠T细胞亚群影响的实验 BALB/c小鼠100只,雌雄各半,随机分为5组,组别分别为①空白对照组②青藤碱高剂量③青藤碱中剂量④青藤碱低剂量⑤地塞米松剂量组。每组动物20只,连续给药21天后,其中空白对照组灌胃生理盐水,各给药组均每天给药,;给药21天后小鼠眼眶取血,,肝素抗凝,通过BECKMAN流式细胞分析仪器测定CD3+、CD4+和CD8+。
ConA诱导的淋巴细胞增殖实验(MTT法[2]) BALB/c小鼠120只,雌雄各半,随机分为6组,组别分别为①空白对照组②青藤碱高剂量③青藤碱中剂量④青藤碱低剂量⑤地塞米松剂量组;每组动物20只,连续给药21天,其中空白对照组灌胃生理盐水,各给药组均每天给药,;给