文档介绍：该【无菌检查用培养基灭菌后的保存有效期的验证方法 】是由【青山代下】上传分享，文档一共【24】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【无菌检查用培养基灭菌后的保存有效期的验证方法 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。:..,此两种培育基均为商品化的脱水培育基。依据《中国药典》2023版规定,无菌检查用的硫乙醇酸盐流体培育基和胰酪大豆胨液体培育基等应符合培育基的无菌性检查及灵敏度检查的要求,制备好的培育基假设不即时使用,应置于无菌密闭容器中,在2~25℃、避光的环境下保存,并在阅历证的保存期内使用。因此,拟对胰酪大豆胨液体培育基及硫乙醇酸盐流体培育基在灭菌后的保存期进展验证,验证方法为:培育基灭菌后冷处保存〔冰柜保存2~10℃〕,确认在保存期内两种培育基的pH值、无菌性及灵敏度是否符合要求;每种培育基应进展三个配制批次验证;分别确认培育基在灭菌后保存0天、1天、2天、3天、4天、5天的pH值、无菌性检查及灵敏度检查是否符合要求;依据验证结果,确认硫乙醇酸盐流体培育基和胰酪大豆胨液体培育基在灭菌后的保存时限。,确认无菌检查用培育基灭菌后在保存有效期内的pH值、无菌性检查及灵敏度检查是否符合要求。,验证工程包括:先决条件确认、试验设备及器材确认、培育基确认、灭菌效果确认、包装贮存确认、培育基pH值确认、培育基无菌性检查确认及培育基灵敏度检查确认。:负责验证方案、报告的起草;负责依据批准的方案进展验证操作;负责对验证数据进展收集、整理、分析;负责记录在确认过程中全部发生的偏差及变更;负责针对偏差及变更,并提出解决方案,以实行订正行动;负责验证过程中的相关检验工作;负责验证结果的总结、分析评价工作;负责人负责审核文件。第页共24页:..:负责监视整个验证活动,确保验证按打算进度进展;负责过验证工程的验证;负责对验证数据进展收集、整理、分析;负责变差、变更的调查和处理,偏差调查报告及变更状况上报审批;负责人负责审核文件。质量治理负责人职责:负责最终批准文件。:负责最终批准验证文件。《中国药典》:确认全部进展验证的先决条件已经得到满足。:;;,并签字确认。:本验证方案得到批准,执行本方案的人员已得到培训。:见附件表1;如觉察偏差应记录在偏差报告中。:确认实施过程中所需的全部设备、器材是否正常、完整。:、器材是否正常、完整。,并签字确认。:全部实施过程中所用设备、器材正常、完整。、器材确认报告:见附件表2。:确认培育基质量及配制是否符合要要求。:第页共24页:..、批号、数量、生产单位、外观外形〔瓶盖密封度、内容物有无结块霉变等〕,处方和使用说明、有效期、储存条件,及生产商供给的质控报告。检查确认后将确认结果填入附件表3中。:依据硫乙醇酸盐流体培育基-水〔:1L〕比例称取硫乙醇酸盐流体培育基,加热煮沸使完全溶解,摇匀分装于无菌检验用专用瓶内〔500ml/瓶〕,121℃高压灭菌15min,即可。胰酪大豆胨液体培育基的配制:依据胰酪大豆胨液体培育基-水〔:1L〕比例称取胰酪大豆胨液体培育基,微温溶解,分装于无菌检验用专用瓶内〔500ml/瓶〕,经121℃高压灭菌15min,灭菌后,即可。配制完毕后将配制日期、配制编号、配制量及分装数量记录在附件表3中。:培育基质量应符合要求,培育基的配制应按说明上的要求操作。:见附件表3;如觉察偏差应记录在偏差报告中。:确认培育基灭菌效果是否符合要要求;:,与培育基同时灭菌。,观看颜色变化。:指示卡到达标准黑色以上,表示符合灭菌条件。:见附件表4;如觉察偏差应记录在偏差报告中。、:确认灭菌后培育及的包装及储存条件是否符合要要求。:,胶塞及螺纹盖是否完好正常,确保其密闭性符合要求。,温度是否可以掌握在2~10℃。:灭菌后的无菌检验专用瓶完好,胶塞及螺纹盖完好正常;冰柜温度掌握范围2~10℃。第页共24页:..、储存条件确认报告:见附件表5;如觉察偏差应记录在偏差报告中。:确认培育基在灭菌后各保存期内的pH值是否符合要要求;:、第1天、第2天、第3天、第4天、第5天,取培育基适量置烧杯中,测定其在25℃的pH值。,并签字确认。:硫乙醇酸盐流体培育基灭菌后在25℃±;胰酪大豆胨液体培育基灭菌后在25℃±。:见附件表6;如觉察偏差应记录在偏差报告中。:确认培育基灭菌后在不同保存期的无菌性检查是否符合要求。:对0天、第1天、第2天、第3天、第4天、第5天各取装量为500ml/瓶的两种培育基各1瓶,经隔离系统外表灭菌后,分别抽取硫乙醇酸盐流体培育基及胰酪大豆胨液体培育基各100ml至于培育器内,两种培育基各1管,硫乙醇酸盐流体培育基在30~35℃培育14天,胰酪大豆胨液体培育基在20~25℃培育14天,逐日观看。将试验结果填入附件表7中,并签字确认。:灭菌后的每批培育基经14天培育,应无菌生长。:见附件表7;如觉察偏差应记录在偏差报告中。:确认培育基灭菌后在不同保存期的灵敏度检查是否符合要求。:(从菌种保存中心获得的冷冻枯燥菌种为第0代),并承受适宜的菌种保藏技术进展保存,以保证试验菌株的生物学特性。检查确认菌种名称、菌种标准号、工作菌种编号、来源、传代次数,检查确认后将结果填入附件表8中,并签字确认。金黄色葡萄球菌〔usaureus〕[〔B〕26003]铜绿假单胞菌〔Pseudomonasaeruginosa〕[〔B〕10104]枯草芽孢杆菌〔Bacillussubtilis〕[〔B〕63501]第页共24页:..生孢梭菌〔Clostridiumsporogenes〕[〔B〕64941]白色念珠菌〔Candidaalbicans〕[〔F〕98001]黑曲霉〔Aspergillusniger〕[〔F〕98003]、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的颖培育物至胰酪大豆胨液体培育基或胰酪大豆胨琼脂培育基上,接种生孢梭菌的颖培育物至硫乙醇酸盐流体培育基中,30~35℃培育18~24小时;接种白色念珠菌的颖培育物至沙氏葡萄糖液体培育基中或沙氏葡萄糖琼脂培育基上,20~25℃培育24~48小时,%无菌***化钠溶液制成每lm含菌数小于lOOcfu(菌落形成单位〕的菌悬液。%无菌***化钠溶液制成每lml含孢子数小于lOOcfu的黑曲霉孢子悬液。菌悬液假设在室温下放置,应在2小时内使用;假设保存在2~8℃可在24小时内使用。将活菌计数结果填入附件表9中。、第1天、第2天、第3天、第4天、第5天进展如下试验:取硫乙醇酸盐流体培育基2瓶,经隔离系统外表灭菌后,抽取硫乙醇酸盐流体培育基于培育器中,每管100ml,共7管,分别接种小于100cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌各2管,另1管不接种作为空白比照,培育不超过3天;取胰酪大豆胨液体培育基2瓶,经隔离系统外表灭菌后,抽取胰酪大豆胨液体培育基于培育器中,每管100ml,共7管,分别接种小于100cfu的枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉各2管,另1管不接种作为空白比照,加枯草芽孢杆菌的培育基培育不超过3天,加白色念珠菌及黑曲霉的培育基培育不超过5天。逐日观看结果。将试验数据填入附件表9中,并签字确认。:空白比照管应无菌生长,全部加菌的培育基管应生长良好。:见附件表9;如觉察偏差应记录在偏差报告中。,并将偏差内容列在附件表10中。,应对变更局部的内容进展确认,并经过质量治理负责人批准,并将变更清单列在附件表11中。:..由质量掌握部硫乙醇酸盐流体培育基及胰酪大豆胨液体培育基灭菌后的保存时限验证方案执行人员负责收集执行过程中的相关资料和数据,并做最终的总结及评价,并填写最终结论。由质量掌握部及QA部门对验证和最终结论进展审核,审核应包括:??修改缘由、依据以及是否经过批准???偏差及对偏差的说明是否合理?是否需要进一步补充确认?。第页共24页:..:先决条件确认表相关人员培训记录培训内容:培训教师:培训日期:被培训人:培训状况确认检查结果序号工程承受标准是否1人员培训执行本方案的人员已得到培训2验证方案验证方案已得到批准结论:确认人日期复核人日期第页共24页:..表2:验证设备及器材确认表是否正常、完整序号设备、器材名称型号生产厂家是否结论:确认人日期复核人日期第页共24页:..表3::批号::批号:是否在有外观外形生产商供给的质控处方和说明书效期内贮藏条件是否正常报告质量确认是否是否有无有无配制日期配制编号配制量分装数量配制确认结论:确认人日期复核人日期第页共24页:..4:灭菌效果确认表是否符合要求灭菌时间培育基名称培育基配制编号承受标准指示卡试验结果是否硫乙醇酸盐流体培育基胰酪大豆胨液体培育基硫乙醇酸盐流体培育基指示卡到达标胰酪大豆胨液准黑色以上体培育基硫乙醇酸盐流体培育基胰酪大豆胨液体培育基指示卡粘贴处指示卡粘贴处指示卡粘贴处结论:确认人日期复核人日期第页共24页:..5:包装、贮存条件确认是否符合要求确认项标准确认结果是否灭菌后的无菌检查用专用瓶完好无裂纹,胶塞密包装闭完好,螺纹盖完好无裂纹。贮存条件2~10℃,避光结论:确认人日期复核人日期第页共24页:..6:pH值确认表pH值〔25℃〕培育基名称配制编号0天1天2天3天4天5天硫乙醇酸盐流体培育基胰酪大豆胨液体培育基承受标准:硫乙醇酸盐流体培育基灭菌后在25℃±;胰酪大豆胨液体培育基灭菌后在25℃±:确认人日期复核人日期第页共24页:..7:菌种确认表菌种名称菌种标准号工作菌种编号来源传代次数结论:确认人日期复核人日期第页共24页:..8-:培育基无菌性检查确认表结果培育基名称配制编号保存时间01020304050607080第0天第1天第2天第3天第4天第5天第0天第1天硫乙醇酸盐流第2天体培育基第3天第4天第5天第0天第1天第2天第3天第4天第5天确认人日期复核人日期第页共24页:..8-:培育基无菌性检查确认表结果培育基名称配制编号保存时间01020304050607080第0天第1天第2天第3天第4天第5天第0天第1天胰酪大豆胨液第2天体培育基第3天第4天第5天第0天第1天第2天第3天第4天第5天硫乙醇酸盐流体培育基在30~35℃培育,胰酪大豆胨液体培育基在20~25℃培育,培育14检查标准菌生长用“-”表示。承受标准在14天内应无菌生长。结论:确认人日期复核人日期第页共24页:..表9-:培育基灵敏度检查确认表保存灵敏度检查结果培育基配制编号时间菌种金黄色葡萄球菌生孢梭菌计数0天接种时间〔天〕1231231培育结果计数1天接种时间〔天〕1231231培育结果计数2天接种时间〔天〕1231231硫乙醇酸盐流体培育结果培育基计数3天接种时间〔天〕1231231培育结果计数4天接种时间〔天〕1231231培育结果计数5天接种时间〔天〕1231231培育结果确认人日期复核人日期:..表9-:培育基灵敏度检查确认表保存灵敏度检查结果培育基配制编号时间菌种金黄色葡萄球菌生孢梭菌计数0天接种时间〔天〕1231231培育结果计数1天接种时间〔天〕1231231培育结果计数2天接种时间〔天〕1231231硫乙醇酸盐流体培育结果培育基计数3天接种时间〔天〕1231231培育结果计数4天接种时间〔天〕1231231培育结果计数5天接种时间〔天〕1231231培育结果确认人日期复核人日期:..表9-:培育基灵敏度检查确认表保存灵敏度检查结果培育基配制编号时间菌种金黄色葡萄球菌生孢梭菌计数0天接种时间〔天〕1231231培育结果计数1天接种时间〔天〕1231231培育结果计数2天接种时间〔天〕1231231硫乙醇酸盐流体培育结果培育基计数3天接种时间〔天〕1231231培育结果计数4天接种时间〔天〕1231231培育结果计数5天接种时间〔天〕1231231培育结果确认人日期复核人日期:..表9-:培育基灵敏度检查确认表保存灵敏度检查结果培育基配制编号时间菌种枯草芽孢杆菌白色念珠菌计数0天接种时间〔天〕123123451培育结果计数1天接种时间〔天〕123123451培育结果计数2天接种时间〔天〕123123451培育结果胰酪大豆胨液体培育基计数3天接种时间〔天〕123123451培育结果计数4天接种时间〔天〕123123451培育结果计数5天接种时间〔天〕123123451培育结果确认人日期复核人日期:..表9-:培育基灵敏度检查确认表保存灵敏度检查结果培育基配制编号时间菌种枯草芽孢杆菌白色念珠菌计数0天接种时间〔天〕123123451培育结果计数1天接种时间〔天〕123123451培育结果计数2天接种时间〔天〕123123451培育结果胰酪大豆胨液体培育基计数3天接种时间〔天〕123123451培育结果计数4天接种时间〔天〕123123451培育结果计数5天接种时间〔天〕123123451培育结果确认人日期复核人日期:..表9-:培育基灵敏度检查确认表保存灵敏度检查结果培育基配制编号时间菌种枯草芽孢杆菌白色念珠菌计数0天接种时间〔天〕123123451培育结果计数1天接种时间〔天〕123123451培育结果计数2天接种时间〔天〕123123451培育结果胰酪大豆胨液体培育基计数3天接种时间〔天〕123123451培育结果计数4天接种时间〔天〕123123451培育结果计数5天接种时间〔天〕123123451培育结果加金黄色葡萄球菌、生孢梭菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的培育基管30~35℃培育3天,白色念珠检查标准生长良好用“+”表示,生长不良好或无菌生长用“-”表示。承受标准空白白比照管应无菌生长,全部加菌的培育基管应生长良好。结论确认人日期复核人日期:..表10:偏差处理清单偏差是否关偏差号偏差概述关闭日期负责人闭是□否□是□否□是□否□确认人日期复核人日期第页共24页:..表11:变更掌握清单变更是否变更号变更内容概述关闭日期负责人关闭是□否□是□否□是□否□确认人日期复核人日期第页共24页:..、