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ELP-Intein介导的CA-MA抗菌肽的原核表达与纯化的中期报告.docx

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ELP-Intein介导的CA-MA抗菌肽的原核表达与纯化的中期报告.docx

上传人:niuww 2024/3/27 文件大小:10 KB

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文档介绍:该【ELP-Intein介导的CA-MA抗菌肽的原核表达与纯化的中期报告 】是由【niuww】上传分享,文档一共【1】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【ELP-Intein介导的CA-MA抗菌肽的原核表达与纯化的中期报告 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。ELP-Intein介导的CA-MA抗菌肽的原核表达与纯化的中期报告ELP-Intein介导的CA-MA抗菌肽是一种由弹性多肽(ELP)和内切酶(intein)蛋白共价连接而成的新型抗菌肽。本研究旨在使用原核系统表达和纯化该抗菌肽。首先,我们设计了一个含有ELP基因和intein基因的重组质粒,并通过电转化的方式将其导入大肠杆菌DH5α中。然后,在含有亲和柱的联络亚硫酰***(IA)培养基中培养转化后的细胞,利用其标记蛋白His6标记,以便后续的亲和纯化。在培养过程中,我们发现细胞对该蛋白的表达效果较低,可能是由于ELP序列在细胞中的可溶性不佳所致。因此,我们在培养过程中逐渐加入异丙醇来提高ELP的可溶性,但仍未能获得高效表达的蛋白。我们正在尝试优化表达条件,如改变诱导温度和时间、改变培养基成分等。目前,我们已经成功制备了含有His6标签的ELP-Intein蛋白的细胞裂解液,并使用His-Tag柱进行了初步的亲和纯化。下一步将进行离子交换层析和透析等步骤来进一步纯化和评估该抗菌肽的活性。总的来说,我们在ELP-Intein介导的CA-MA抗菌肽表达和纯化方面遇到了一些挑战,但我们正在尝试优化表达条件和工艺流程,以获得更高纯度和更好的活性。