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径过大的AuNPs胶构纳米组装探针用于microRNA-21的检测[23](见图体稳定性不足,信号稳定性变差,同时大颗粒与目2(b))。其中,核心AuNPs和卫星AuNPs通过DNA标物结合时可能会存在位阻效应反而降低其结合链连接,目标物microRNA-21通过链置换反应可使率[22]。Kalluri等构建了基于AuNPs聚集的As3+传感卫星AuNPs脱落引发解组装。而燃料DNA链又通器,探究了AuNPs的粒径对检测灵敏度的影响。结过链置换反应使microRNA-21重新解离出来实现果表明,LOD随着AuNPs粒径的增大而逐渐降低,循环利用,从而使信号得到放大。该方法对当粒径为110nm时,LOD低至3pg/mL[26]。Huang等microRNA-21的定量检测范围为5~150pmol/L,。均相免洗免疫分析技术[4]。,可结合多个AuNPs探针形成组装结AuNPs探针与目标物特异性结合后,无论是游离的构,使纳米尺寸的AuNPs探针表观水化粒径达到微还是结合的探针部分均会产生目标物引起的浓度米级别,从而使隐身的细菌“显形”。他们探究了探差,从而表现出散射光强度的差异。Chao等以片状针粒径对灵敏度的影响。结果表明,30、70、100nm二氧化锰修饰的AuNPs(MnO2-pAuNP)、记材料构建了检测前列腺特异性抗原(prostate-、。大粒径探针光散射能力更强、specificantigen,PSA)的超灵敏DLS免疫分析方法所需工作浓度更低、检测灵敏度更高。基于100nm(见图3(a))[24]。样本中存在PSA时,酶标板上会捕AuNPs探针的DLS传感器LOD最低,-pAuNP免疫探针,通过谷胱甘肽CFU/mL,结合免疫磁分析方法,生菜样品中LOD为(glutathione,GSH)。多枝状金纳米花(goldnanoflowers,AuNPs到溶液中,通过检测溶液中AuNPs引起的散AuNFs)因有更大的比表面积,而具有更强的光散射:..,且能修饰更多的识别分子从而获得高亲和力LR-卵清蛋白(MC-LR-OVA)修饰的AuNRs作为自的探针,另外其胶体稳定性也更高,所以理论上是组装探针,构建了针对微囊藻***LR(microcystin更理想的DLS传感器探针。Zhan等以AuNFs为探LR,MC-LR)的竞争免疫DLS传感器。通过将抗体、针构建了相似的DLS均相免洗免疫传感器,实现对MC-LR-OVA定点修饰在AuNRs的“顶端”或“长大肠杆菌O157:H7的高灵敏检测[10]。同时也探边”,分别实现了AuNRs探针的“头对头”或“肩并讨了AuNFs粒径对检测灵敏度的影响。结果显示,肩”的定向自组装。目标物MC-LR的存在会破坏基于120nmAuNFs的DLS传感器灵敏度最高,其AuNRs探针的自组装,从而使AuNRs组装体的尺线性范围为6~60000CFU/mL,,寸发生变化。通过分析组装体尺寸检测目标物,“头实现单菌水平检测。金纳米棒(goldnanorods,对头”或“肩并肩”组装模式的DLS传感器LOD分AuNRs)是应用最广的异形AuNPs,通过对其“顶端”、[27]。或“长边”进行定点修饰,可实现“头对头”或“肩并理论上,当探针浓度越低时,其对外界刺激(包肩”的定向自组装。Wang等将抗体、微囊藻***括目标物)越敏感(受目标物影响而发生聚集等现:..)。然而,当探针浓度过低时,,信噪比反而下降。Driskell等在PR8型流感病大的比重,其蓄积性、慢性毒性等特点导致其对人毒A的AuNP-DLS免疫分析方法中,探讨了AuNPs体健康影响巨大。AuNP-DLS传感器已应用于***[6]、浓度对检测灵敏度的影响。结果表明,在能充分抑铜[28]、铅[29]、***[26]等多种重金属的高灵敏检测。制背景信号的基础上,探针浓度越低,检测灵敏度Miao等基于Cu2+依赖型DNA酶和柠檬酸修饰越高[22]。的AuNPs构建了均相Cu2+传感器[28]。DNA酶与底物结合成双链结构,无法吸附在AuNPs表面,加入22222DDDDDLLLLLSSSSS传传传传传感感感感感器器器器器的的的的的食食食食食品品品品品安安安安安全全全全全检检检检检测测测测测应应应应应用用用用用现现现现现状状状状状后会发生聚集;而加入2+后,活化的NaClAuNPsCu近年来,农兽药残留、重金属污染、致病微生物DNA酶切割底物DNA,释放出一段单链DNA并吸污染、超剂量或超范围使用添加剂等食品安全问题附在AuNPs表面,可阻止AuNPs聚集。根据水化粒严重威胁国人饮食安全和生命健康。如何高效、便径变化值可估算Cu2+浓度,~,LOD为60pmol/L。此外,他们利用Pb2+民“舌尖上的安全”的关键。AuNP-DLS传感器因其依赖型DNA酶和寡核苷酸修饰的AuNPs构建了均简单、快速、成本低廉、高灵敏度、可实现均相免洗相Pb2+传感器[29]。AuNPs探针可通过与底物DNA互检测等优点,成为优良的食品危害物检测技术平补杂交而发生聚集,然而Pb2+存在时,活化的酶催化台。DLS传感器用于食品安全检测的研究见表1。切断底物DNA,从而阻止AuNPs聚集。最低可检测:..35pmol/L的Pb2+。Kalluri等以GSH、二硫苏糖醇和色信号灵敏度(1ng/mL)[26]。***信号和DLS信号的均相As3+传感器。As3+与3种配生物***是广泛存在的食品污染物,尤其以真体均可通过配位作用结合引起AuNPs聚集,从而导菌***对粮油及其制品的污染问题最受关注[38]。以致等离子共振峰(比色信号)和粒径的急剧变化。结抗体为识别分子、以AuNPs为信号输出探针的DLS果显示,DLS检测As3+的灵敏度(3pg/mL)~***,灵表1AuNP-DLS传感器在食品安全检测中的应用研究现状Table1ResearchstatusoftheapplicationofAuNP-DLSsensorsforfoodcontaminationdetection分析物探针信号输出机制检测限样本文献寡核苷酸基于T-Hg2+-T结合形成双链,脱离AuNPs表Hg2+[6]面,使AuNPs聚集Cu2+激活DNA酶,剪切底物DNA,释放单链DNA作为表Cu2+柠檬酸修饰的AuNPs60pmol/L水[28]面配体阻止AuNPs在高盐环境下聚集Pb2+激活DNA酶,剪切底物DNA,阻止AuNPs探针通过Pb2+寡核苷酸修饰的AuNPs35pmol/L水[39]与底物DNA链杂交发生聚集GSH、DTT和Cys共修As3+通过与配体分子的配位作用,使AuNPs探针发生聚As3+3pg/mL水[26]饰的AuNPs集,引起等离子共振峰红移,粒径增大标记酶GOx与溶液中HRP级联催化葡萄糖产羟自由黄曲霉毒柠檬酸修饰的AuNPs基,引发溶液中酪***聚集,酪***[5]素B1AuNPs聚集黄曲霉毒BSA-AFM修饰的目标物AFM竞争抑制探针在免疫磁珠表面的结合,[30]素MAuNPs而调控聚集体粒径变化MC-LR-OVA修饰的目标物MC-LR的存在会破坏AuNRs探针“肩并肩”[27]AuNRs、抗体修饰的“头对头”的定向自组装,从而使AuNRs组装体的尺寸发素LRAuNRs生变化ng/mL、5pg/mL对氧磷带正电的胆碱诱使AuNPs聚集,[31](农药)性,降低胆碱的生成,使聚集程度降低***霉素***霉素修饰的AuNPs***霉素的存在抑制探针在免疫磁珠表面聚集,[32](抗生素)集体尺寸减小三聚******通过静电相互作用与带负电的探针结合引起三聚******柠檬酸修饰的AuNPs50ng/mL牛奶[33]AuNPs聚集,粒径增大目标菌DNA经不对称PCR扩增出单链DNA,单链DNA沙门氏菌寡核苷酸修饰的AuNPs通过互补配对杂交引起AuNPs聚集26CFU/mL牛奶[34]大肠杆菌经PCR扩增后的目标菌DNA通过互补杂交与探针寡核寡核苷酸修饰的AuNPs10CFU/mL牛奶[34]O157:H7苷酸链形成三链体结构,引起AuNPs聚集目标DNA与RNA配体杂交引发核酸内切酶切割RNA空肠弯曲链,使探针表面配体减少,稳定性降低,进而发生聚集,[35]杆菌DNA粒径增大,而切割后释放的目标DNA则被循环利用起到信号放大作用AuNPs-DNA作为可识别模板DNA的类TaqMan探针,单增李斯寡核苷酸修饰的AuNPs在PCR扩增过程中,表面寡核苷酸配体被Taq酶切割,—[36]特菌DNA释放的裸露AuNPs在Mg2+作用下发生聚集,粒径增大大肠杆菌抗体修饰的多枝状免疫探针吸附在细菌表面,[10]O157:H7AuNPs级增大到微米级单增李斯免疫探针吸附在细菌表面,使探针表观水化粒径从纳米特菌抗体修饰的AuNPs级增大到微米级22CFU/g生菜[4]转基因目的DNA与寡核苷酸探针杂交,使其无法吸附在缓冲寡核苷酸修饰的AuNPs30fmol/L[37]DNA序列AuNPs表面,导致AuNPs在高盐环境下聚集液注:AuNPs未经特别说明均指球形金纳米颗粒。:..敏度较常规ELISA方法高约2个数量级[5,27,30]。如但其存在耗时长(通常需要24~48h)、操作烦琐等Zhang等以免疫磁珠为载体,以抗原-牛血清白蛋白缺陷,无法实现对致病菌的高效监测。据研究报道,(bovineserumalbumin,BSA)复合物修饰的30nmAuNP-DLS分析方法能实现致病菌或其DNA的快AuNPs为信号输出探针,构建竞争DLS免疫分析方速(2~4h)、高灵敏检测,是潜在的优良筛查技术。法检测牛奶中的黄曲霉***M(aflatoxinM,AFM)。Huang和Zhan等分别以抗体修饰的球状在形成免疫复合物后进行磁分离,通过检测溶液的AuNPs和多枝状AuNFs为免疫探针检测生菜中单散射光强度实现对AFM的快速定量分析,LOD达增李斯特菌和牛奶中的大肠杆菌O157:H7,[30]。基于AuNPs的等离子共振吸收为输到LOD为10CFU/g和单菌检测水平[4,10]。周宝青将出信号的等离子共振ELISA(plasmonicELISA,PCR扩增技术与以扩增DNA为目标的AuNP-DLSpELISA)是近年来比较受欢迎的高灵敏比色分析技技术结合,检测牛奶中沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7,术。Zhan等以GOx为酶标记物,构建针对黄曲霉毒LOD达10CFU/mL[34]。Mcvey等以RNA修饰的素B1(aflatoxinB1,AFB1)的竞争免疫分析方法[5]。AuNPs为探针,开发一种利用核酸内切酶控制GOx可与体系中的辣根过氧化物酶(HRP)级联催AuNPs聚集的方法检测致病菌DNA[35]。AuNPs表面化葡萄糖产生·OH,引发静电吸附在AuNPs探针表的RNA可与目标DNA特异性杂交形成DNA-RNA面的酪***发生交联反应,进而导致AuNPs聚集,通异源双链结构,该结构很容易被RNAseH酶切,,直至所AFB1。该方法比竞争pELISA和常规ELISA方法的有的RNA探针被切割,使暴露在高电解质中的灵敏度分别提高了153倍和385倍。AuNPs聚集并产生粒径信号变化。,总分析近年来,我国农兽药残留和非法添加物引起的时间不到3h。食品安全事件频发,社会影响极其恶劣[39]。乙酰胆碱3333展展展展展望望望望望酯酶催化乙酰胆碱水解可产生带正电的胆碱,其可使带负电的柠檬酸修饰的AuNPs发生聚集。Alami由于AuNPs易制备和便于修饰的特点,AuNP-等基于这一原理设计了针对农药对氧磷的DLS传DLS传感器构建过程非常简单,可实现均相分析,感器。对氧磷会抑制体系中乙酰胆碱酯酶活性,阻也可与多种技术如ELISA[5]和核酸扩增[19-20]结合。同止乙酰胆碱水解生成胆碱,从而导致AuNPs聚集程时,由于DLS仪器的高灵敏性和AuNPs超强的光度下降。,由于灵敏度散射能力,AuNP-DLS传感器具备简单、快速和灵敏极高,在检测实际样品时可进行大比例稀释,从而性高等优点,在食品安全、临床诊断和环境监测等可降低农药残留中基质效应的影响,提高检测准确生化分析领域具