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尤文肉瘤EWS-FLI1基因原核表达质粒的构建及鉴定的综述报告.docx

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尤文肉瘤EWS-FLI1基因原核表达质粒的构建及鉴定的综述报告.docx

上传人:niuwk 2024/4/15 文件大小:10 KB

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文档介绍:该【尤文肉瘤EWS-FLI1基因原核表达质粒的构建及鉴定的综述报告 】是由【niuwk】上传分享,文档一共【2】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【尤文肉瘤EWS-FLI1基因原核表达质粒的构建及鉴定的综述报告 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。尤文肉瘤EWS-FLI1基因原核表达质粒的构建及鉴定的综述报告尤文肉瘤(Ewing'a)是一种少见的、恶性的骨肉瘤,多发生在儿童和青少年中,常发生在四肢长骨和骨盆等部位。EWS-FLI1基因是尤文肉瘤的标志性特征,大约85%至90%的Ewing'a会伴有EWS-FLI1融合基因表达。EWS-FLI1基因是由EWSR1基因和FLI1基因的融合形成的,EWSR1基因位于22号染色体上,是一个编码RNA结合蛋白的基因,而FLI1基因位于11号染色体上,编码E26转录因子家族的一员FLI1蛋白。融合后的EWS-FLI1基因与许多细胞肥大和增殖相关的基因调节有关,从而促进了细胞的转化和癌症的发生。为了研究这个重要的基因和相关的肿瘤机制,研究人员需要构建EWS-FLI1基因的表达质粒。在基因工程领域,许多研究人员使用质粒作为载体,将目标基因克隆到质粒中进行可控性表达。在构建EWS-FLI1表达质粒时,研究人员在实验室中采取了许多技术手段来确保构建的质粒具有高效性和稳定性。首先,由于EWS-FLI1基因是由EWSR1基因和FLI1基因的特定融合形式形成的,因此,研究人员需要收集这两个基因的DNA序列,并将它们克隆到同一质粒中,以确保它们能够正确结合并产生融合基因。其次,对于构建高效和稳定的表达质粒,研究人员需要选择一个合适的表达宿主。在这种情况下,通常使用大肠杆菌(Escherichiacoli)作为表达宿主,因为它是最常用的、质粒容易传递和表达的微生物之一。然而,研究人员还可以使用其他表达宿主,如酵母菌或哺乳动物细胞,以便在特殊情况下实现更好的表达效果和基因组稳定性。最后,研究人员需要用适当的工具鉴定构建的质粒是否有效,以确保它们可以正确表达目标基因。常用的工具包括限制酶切分析、PCR检测、DNA序列测定以及蛋白质分离和免疫印迹等技术。总之,构建和鉴定EWS-FLI1基因表达质粒是研究尤文肉瘤和相关癌症的重要研究工具,依靠这些工具,研究人员能够深入研究EWS-FLI1基因的功能及其与肿瘤生长和转化的关系。