文档介绍：该【一种大蒜伤愈组织种子细胞的生产方法 】是由【开心果】上传分享，文档一共【6】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【一种大蒜伤愈组织种子细胞的生产方法 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。一种大蒜伤愈组织种子细胞的生产方法一种大蒜伤愈组织种子细胞的生产方法本发明涉及一种大蒜伤愈组织种子细胞的生产方法,该方法通过对大蒜消毒、切割,然后对伤愈组织进行诱导和培养,产生可以作为大批量发酵生产用的伤愈组织细胞种子。该方法可以为工业生产SOD提供高产、耐受性好的优良种子细胞。【专利说明】一种大蒜伤愈组织种子细胞的生产方法【技术领域】[0001]本发明提供一种大蒜伤愈组织种子细胞的生产方法,属于食品工业发酵领域。【背景技术】[0002]SOD(超氧化物歧化酶)是一种应用广泛的具有很高的经济价值的酶,目前生产该酶的方法主要通过大蒜伤愈组织细胞的深层发酵培养来获得,因此大蒜伤愈组织种子细胞的优良与否就成了该生产的关键,现有技术中获得大蒜伤愈组织细胞种子的方法复杂、效率低、细胞种子活力低,因此导致生产效率低下。[0003]【发明内容】:本发明是在传统工艺的基础上,通过调整工艺步骤和条件,提供一个高效的获得大蒜伤愈组织种子细胞的方法,并摸索出两种培养基的配比,分别为,诱导培养基:蔗糖3%,%,,再添加2ppm的2,4-二***-糠基氨基嘌呤;悬浮培养基:蔗糖1_3%、葡萄糖1-2%、***-%、***-%、-%,。[0004]本发明的技术方案:A、将大蒜在5-7°C下贮藏25-30天,然后去除保护叶,用无菌水冲洗带皮的蒜瓣,用70%的乙醇漂洗40-60秒,%的升***溶液中浸泡7-10分钟;B、将A步骤所得蒜瓣用无菌水冲洗2-3遍,然后将蒜瓣切成3-8块(视自然蒜瓣的大小而定)的带皮蒜块,尽量做到大小均匀,接种到盛有30ml伤愈组织诱导培养基的三角瓶中,每瓶20-30块;C、将B步骤的三角瓶在24-26°C、光照强度500-7001uX的条件下培养,每天循环光照11-14小时,14-16天,备用;D、将C步骤所得大蒜伤愈组织细胞按接种到悬浮培养基中进行培养,接种比例按一个三角瓶接种5-8L悬浮培养基;EjfD步骤接种后的悬浮培养基在25-30°C,pH值在5_6,培养6_8天;F、将E步骤的培养清液按1:10的比例,移种至同样的悬浮培养基中,以25-30°C,pH值在5-6,培养6-8天;G、重复F步骤3-5次,取样在显微镜下观察细胞形态,当细胞形态整齐一致,且为圆形或椭圆形,即为成品种子细胞。[0005]本发明解决的技术问题:本发明通过改善传统工艺,大大提高了获得大蒜伤愈组织种子细胞的效率,并且所获得的种子细胞传代稳定、活力好、耐受性强,提高了工业生产的效率。[0006]【具体实施方式】:实施例1:A、将大蒜在5°C下贮藏25天,然后去除保护叶,用无菌水冲洗带皮的蒜瓣,用70%的乙醇漂洗40秒,%的升***溶液中浸泡7分钟;B、将A步骤所得蒜瓣用无菌水冲洗2遍,然后将蒜瓣切成3-8块(视自然蒜瓣的大小而定)的带皮蒜块,尽量做到大小均匀,接种到盛有30ml伤愈组织诱导培养基的三角瓶中,每瓶20块;C、将B步骤的三角瓶在24°C、光照强度5001UX的条件下培养,每天循环光照11小时,14天,备用;D、将C步骤所得大蒜伤愈组织细胞按接种到悬浮培养基中进行培养,接种比例按一个三角瓶接种5L悬浮培养基;EjfD步骤接种后的悬浮培养基在25°C,pH值在5,培养6天;F、将E步骤的培养清液按1:10的比例,移种至同样的悬浮培养基中,以25°C,pH值在5,培养6天;G、重复F步骤3次,取样在显微镜下观察细胞形态,发现细胞形态整齐一致,且为圆形或椭圆形,即为成品种子细胞。[0007]通过以上步骤获得的种子细胞经过发酵验证,,%。[0008]实施例2:A、将大蒜在7°C下贮藏30天,然后去除保护叶,用无菌水冲洗带皮的蒜瓣,用70%的乙醇漂洗60秒,%的升萊溶液中浸泡10分钟;B、将A步骤所得蒜瓣用无菌水冲洗3遍,然后将蒜瓣切成3-8块(视自然蒜瓣的大小而定)的带皮蒜块,尽量做到大小均匀,接种到盛有30ml伤愈组织诱导培养基的三角瓶中,每瓶30块;C、将B步骤的三角瓶在26°C、光照强度7001UX的条件下培养,每天循环光照14小时,16天,备用;D、将C步骤所得大蒜伤愈组织细胞按接种到悬浮培养基中进行培养,接种比例按一个三角瓶接种8L悬浮培养基;EjfD步骤接种后的悬浮培养基在30°C,pH值在6,培养8天;F、将E步骤的培养清液按1:10的比例,移种至同样的悬浮培养基中,以30°C,pH值在6,培养8天;G、重复F步骤5次,取样在显微镜下观察细胞形态,发现细胞形态整齐一致,且为圆形或椭圆形,即为成品种子细胞。[0009]通过以上步骤获得的种子细胞经过发酵验证,,%。【权利要求】,其特征在于,通过以下工艺步骤实现:A、将大蒜在5-7°C下贮藏25-30天,然后去除保护叶,用无菌水冲洗带皮的蒜瓣,用70%的乙醇漂洗40-60秒,%的升***溶液中浸泡7-10分钟;B、将A步骤所得蒜瓣用无菌水冲洗2-3遍,然后将蒜瓣切成3-8块(视自然蒜瓣的大小而定)的带皮蒜块,尽量做到大小均匀,接种到盛有30ml伤愈组织诱导培养基的三角瓶中,每瓶20-30块;C、将B步骤的三角瓶在24-26°C、光照强度500-7001uX的条件下培养,每天循环光照11-14小时,14-16天,备用;D、将C步骤所得大蒜伤愈组织细胞按接种到悬浮培养基中进行培养,接种比例按一个三角瓶接种5-8L悬浮培养基;EjfD步骤接种后的悬浮培养基在25-30°C,pH值在5_6,培养6_8天;F、将E步骤的培养清液按1:10的比例,移种至同样的悬浮培养基中,以25-30°C,pH值在5-6,培养6-8天;G、重复F步骤3-5次,取样在显微镜下观察细胞形态,当细胞形态整齐一致,且为圆形或椭圆形,即为成品种子细胞。,其特征在于,所述B步骤中伤愈组织诱导培养基的配比为:蔗糖3%,%,,再添加2ppm的2,4-二***-糠基氨基嘌呤。,其特征在于,所述D步骤的悬浮培养基的配比为:蔗糖1-3%、葡萄糖1-2%、***-%、***铵`-%、-%,。