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一种产虾青素基因工程菌的构建方法.docx

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一种产虾青素基因工程菌的构建方法.docx

上传人:开心果 2024/4/18 文件大小:15 KB

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文档介绍:该【一种产虾青素基因工程菌的构建方法 】是由【开心果】上传分享,文档一共【3】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【一种产虾青素基因工程菌的构建方法 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。一种产虾青素基因工程菌的构建方法一种产虾青素基因工程菌的构建方法本发明公开了一种产虾青素基因工程菌的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:A)构建基因表达模块,所述基因表达模块包括虾青素生产相关的基因、所述虾青素生产相关的基因上游的启动子和所述虾青素生产相关的基因下游的终止子;B)将所述基因表达模块共转化至酿酒酵母中。本发明的方法具有简单快速高效的优点,避免了多级的克隆,也不需要依赖酶切位点,多片段共同转化,同源重组效率高,可以明显缩短工程菌构建时间。【专利说明】一种产虾青素基因工程菌的构建方法【技术领域】[0001]本发明属于微生物发酵领域,具体地说,是关于一种产虾青素基因工程菌的构建方法。【背景技术】[0002]迄今为止,已报道了600多种类胡萝卜素,来源细菌,藻类,酵母和植物兼有,虾青素是其中之一。虾青素的化学全称为3,3'-二羟基-4,4'-二***基-β,β胡萝卜素,结构式为:[0003]【权利要求】,其特征在于,包括以下步骤:A)构建基因表达模块,所述基因表达模块包括虾青素生产相关的基因、所述虾青素生产相关的基因上游的启动子和所述虾青素生产相关的基因下游的终止子;B)将所述基因表达模块共转化至酿酒酵母中。,其特征在于,所述步骤A)中所述基因表达模块还包括抗性基因、所述抗性基因上游的启动子和所述抗性基因下游的终止子。,其特征在于,所述步骤A)中所述构建基因表达模块包括以下步骤:Al)通过PCR扩增获得所述虾青素生产相关的基因、所述抗性基因片段、所述虾青素生产相关的基因上游的启动子片段、所述抗性基因上游的启动子片段、所述虾青素生产相关的基因下游的终止子片段和所述抗性基因下游的终止子片段;A2)以所述虾青素生产相关的基因、所述抗性基因片段、所述虾青素生产相关的基因上游的启动子片段、所述抗性基因上游的启动子片段、所述虾青素生产相关的基因下游的终止子片段和所述抗性基因下游的终止子片段为模板,通过重叠PCR扩增获得基因表达模块。,其特征在于,所述步骤A)中所述虾青素生产相关的基因为crtE、crtYB、crtl、crtZ和crtW。,其特征在于,,,,所述crtZ的GenBank登`,。,其特征在于,所述步骤A)中所述启动子选自ADHlp、TEFlp、TPIlp、PGKlp、FBAlp和PDClp?,其特征在于,所述启动子来源于酿酒酵母。,其特征在于,所述步骤A)中所述终止子选自TKLlt、ADHlt、EN02t、TDH2t、,其特征在于,所述终止子来源于酿酒酵母。,其特征在于,所述抗性基因为ble基因。,其特征在于,所述抗性基因来源于pGAPZaA。