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一次性鉴别羊肉、鸡肉、鸭肉、猪肉的pcr检测方法及试剂盒的制作方法.docx

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一次性鉴别羊肉、鸡肉、鸭肉、猪肉的pcr检测方法及试剂盒的制作方法.docx

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I及4种纯化的目的片段的混合Marker对比,待测肉样含有羊肉、鸡肉、猪肉,与事实相符,12个PCR结果完全一致,说明此方法正确可靠。[0019]本方法用4对引物同时进行多重PCR反应,反应体系和条件一致,4对引物间以及和4种动物的模板DNA间没有相互干扰,不影响结果,4种目的片段大小不同,在电泳图上可以清晰分辨开,因此可一次性的鉴别出4种动物的肉样,节省了时间、人力和试剂、耗材。[0020]【专利附图】【附图说明】附图1四种肉类(鸡肉、猪肉、鸭肉和羊肉)PCR电泳图。【权利要求】、鸭肉、猪肉、鸡肉,利用动物种属间特异性较强的线粒体DNA序列,针对每种动物分别设计各自的种属特异性引物,分别以羊、猪、鸡、鸭4种动物的全基因组DNA为模板,通过PCR反应得到4种长度各不相同的特异性扩增片段,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测,4种长度不同的条带可以在电泳图中分辨出来。4种动物对应的4对引物序列为:羊:S-1:5,-TAGGCATTTGCTT-3,SU'-GAGTAA-3'扩增片段大小为667bp猪:P-1:5,-G-3'Pjj'-CGAGATTGTGCGGTTATTAATGAGTCG-3'扩增片段大小为196bp鸡:C-1:5;-AC-3;C-2:5