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重组牛分枝杆菌ESAT6CFP10蛋白在牛病诊断及细胞活性中的应用研究的开题报告.docx

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重组牛分枝杆菌ESAT6CFP10蛋白在牛病诊断及细胞活性中的应用研究的开题报告.docx

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重组牛分枝杆菌ESAT6CFP10蛋白在牛病诊断及细胞活性中的应用研究的开题报告.docx

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文档介绍:该【重组牛分枝杆菌ESAT6CFP10蛋白在牛病诊断及细胞活性中的应用研究的开题报告 】是由【niuww】上传分享,文档一共【2】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【重组牛分枝杆菌ESAT6CFP10蛋白在牛病诊断及细胞活性中的应用研究的开题报告 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。重组牛分枝杆菌ESAT6CFP10蛋白在牛病诊断及细胞活性中的应用研究的开题报告一、研究背景和意义:牛分枝杆菌是一种重要的致病菌,它引起的感染疾病牛结核对于畜牧业产业有着严重的经济影响,同时也对人畜共患的流行病学造成了威胁。目前国内外研究牛分枝杆菌的主要手段是对其特异蛋白进行筛选和检测,如ESAT6、CFP10等。然而,由于传统方法的一些技术限制,对这些蛋白的研究工作存在一定的困难。因此,本课题拟采用重组DNA技术,将ESAT6和CFP10两个特异的蛋白基因进行重组,构建重组牛分枝杆菌蛋白ESAT6CFP10,并探究该蛋白在牛病诊断以及细胞活性方面的应用,为牛分枝杆菌的防治提供理论依据和实验基础。二、研究内容和方法:1、重组蛋白构建及表达:利用PCR扩增ESAT6和CFP10基因,采用重组DNA技术,构建重组蛋白ESAT6CFP10。然后将构建好的expressionvector转化到大肠杆菌中,进行原核表达。2、纯化重组蛋白:对表达的蛋白经过Ni2+离子亲和层析后进行纯化,以获取纯度较高的蛋白。3、蛋白免疫诊断:利用纯化的重组蛋白,建立牛分枝杆菌感染的诊断方法,对牛分枝杆菌感染的血清进行免疫诊断,探究ESAT6CFP10在牛结核相关的疾病诊断中是否具有较高的特异性和敏感性。4、细胞活性研究:采用MTT法、液氮冻存等方法,探究ESAT6CFP10对牛分枝杆菌感染骨髓巨噬细胞(BMMs)的影响以及其对牛分枝杆菌增殖的抑制作用。三、预期目标和意义:1、成功构建重组牛分枝杆菌蛋白ESAT6CFP10,进行表达和纯化。2、从牛分枝杆菌感染的血清中发现很高的特异性或敏感性的抗体,为牛分枝杆菌感染的临床诊断提供一种新的方法。3、从细胞实验的角度,揭示ESAT6CFP10能够抑制牛分枝杆菌生成,为牛分枝杆菌的防治提供基础理论支撑。总之,本研究对于牛分枝杆菌的防治和控制具有非常重要的意义和实践价值。