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同动物精氨酸酶基因构建的系统进化树3讨论在玉米中,精氨酸酶是氮素循环中催化精氨酸生成鸟氨酸和尿素的重要酶,可促进氮素的再利用,提高氮素的利用效率[3]。在人体中,精氨酸是肝癌细胞繁殖必需的酵素,而精氨酸酶是一种天然酵素,具有分解精氨酸的功能,有助于抑制癌细胞生长,精氨酸酶1在食管癌患者外周血中的高表达与MDSCs水平和食管癌的发生、发展有着密切关系[4]。目前,国外实验室利用cDNA克隆技术已经获得了大菱鲆[5]、虹鳟[6]、斑马鱼[7]、罗氏沼虾[8]等多种鱼虾类的精氨酸酶部分序列或全长序列。现有的研究资料表明,多数鱼类精氨酸酶的分布有组织特异性,一般在肝脏中精氨酸酶含量最高。在大菱鲆中30日龄前精氨酸酶基因表达水平一直很低,30日龄后随日龄增加其表达量逐步上升,至47日龄(标志其底栖生活的开始)达最高峰,随后表达量逐步下降,57日龄后再次上升至较低水平,比较精氨酸酶基因与甲状腺激素受体TRα的表达模式,Oriane等[5]发现当TRα表达水平降低时,精氨酸酶基因表达水平开始升高,证实在大菱鲆胚胎后发育期间精氨酸酶基因和甲状腺激素受体TRα的表达模式呈负相关。本试验用设计的引物和提取的变态期牙鲆仔鱼总RNA进行RT-PCR,获得了一条284bpDN***段并测序。同源性分析显示目的基因与大菱鲆精氨酸酶基因的碱基序列及氨基酸序列的同源性较高,分别为91%和96%;与鲫鱼(Q4A4U9,Cyprinuscarpio)、斑马鱼(Q6PH54,Daniorerio)、虹鳟(Q7T1U6,Oncorhynchusmykiss)碱基序列及推测的氨基酸序列同源性分别为78%/85%、84%/84%和80%/82%。与人(P78540,Homosapienshuman)的氨基酸序列同源性为72%。证明本试验所得到的目的基因片段是目前尚未见报道的牙鲆精氨酸