文档介绍：该【酶制剂生理活性评价技术规范征求意见稿 】是由【书籍1243595614】上传分享，文档一共【7】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【酶制剂生理活性评价技术规范征求意见稿 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。GB/TXXXXX–201231GB/TXXXXX—2012IIGB/TXXXXX—(征求意见稿)发布中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会201X-XX-XX发布201X-XX-XX实施GB/T××××—201×酶制剂生理活性评价技术规范1范围本标准规定了酶制剂生理活性评价原理、仪器和设备、试剂和材料、析步骤及结果计算。本标准适用于饲料、食品等酶制剂的生理活性评价。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。;;中华人民共和国兽药典(2015年版)3术语与定义下列术语和定义适用于本文件。,或由传统或通过基因修饰的微生物(包括但不限于细菌、放线菌、真菌菌种)发酵、提取制得,用于食品加工或提高饲料转化率等,具有特殊催化功能的生物制品。,采用与人或动物体内相近的消化环境和消化酶系,在体外评定外加酶作用或饲料消化吸收的一种方法。,受温度,pH等因素影响所表现出的对底物的消化能力。、盐离子浓度及蛋白酶浓度设置的消化液。、盐离子浓度及胰酶浓度设置的消化液。GB/TXXXXX–20123GB/TXXXXX—2012IIGB/T××××—201×4原理首先用胃蛋白酶在酸性条件下处理含有酶制剂样品的底物,完成在模拟胃内的消化过程,然后再用含有蛋白酶和脂肪酶的胰酶在中性条件下继续消化,完成养分在小肠内的消化过程,最后分离已消化与未消化养分,通过分析酶制剂对主要底物的转化效率,以达到预测食品或饲料中的酶制剂在体内的生理活性的目的。:3800生化级胃蛋白酶(临用前可按《中华人民共和国兽药典》中规定的方法测定胃蛋白酶活性)。,每种酶的酶活性应大于1:3800。,倒入已经装有60mL蒸馏水的烧杯中,不断搅拌,待冷却后转移到容量瓶中并定容至100mL。,冷却后,再转移到100mL的容量瓶中并定容至100mL。***化钠、***化钾、***化钙,。,混合均匀,用1mol/。***化钠,***化钾,***化钙溶解于1L去离子水中。,混合均匀,用1mol/。–20123GB/TXXXXX—2012IIGB/T××××—201×:。:。:震荡120次/min,℃。。:。:,,溶于1mL模拟胃液中备用;液体酶制剂:准确量取50μL,,用模拟胃液定容至1mL,备用。::胃模拟消化阶段:(1:1:1,淀粉+大豆油+鸡蛋白)或饲料模拟物(1:1:1,玉米+小麦+豆粕),,放入50mL具塞三角瓶中,将待测酶制剂样品溶液()置于三角烧瓶中,再加入8mL胃电解质溶液(),,混合均匀后静止10min,加入1mL体外模拟胃液()。混合均匀后放入生化培养箱内,37℃振荡消化(120次/min),消化时间4h。小肠模拟消化阶段:在胃模拟消化的样品中再加入9mL中肠电解质溶液(),。然后加入1mL体外模拟肠液()。混合均匀后放放入生化培养箱内,37℃振荡消化(120次/min),消化时间16h。:以不加酶制剂,而其它处理与实验组相同的锥形瓶作为对照组。:以不加食品模拟物,而其它处理与实验组相同的锥形瓶作为实验空白组。:以不加食品模拟物,而其它处理与对照组相同的锥形瓶作为对照空白组。:消化结束后,将三角烧瓶中的残留物用去离子水完全冲洗到漏斗中过滤。将滤液收集到50mL容量瓶中,摇匀,用去离子水定容至50mL,待用。将过滤后的滤纸及残渣转移培养皿中,待用。GB/TXXXXX–20123GB/TXXXXX—2012IIGB/T××××—201×℃烘干1h,称重,再置入烘箱30min,如此反复烘干至恒重(),最后一次称重即为干物质质量。,,按《》方法进行测试,计算滤液中游离氨基酸含量。,,按《》方法进行测试,计算滤液中脂肪酸的含量。,,按《GB/》方法进行测试,计算滤液中还原糖的含量。注:,,,选择性检测。(1)进行计算:干物质体外消化率A=100%?M1?M0M×100%(1)M——食品模拟物干物质质量(g);M1——滤渣干物质质量(g);M0——空白组滤渣干物质质量(g)。(2)进行计算:游离氨基酸体外生成率B(%)=(P1?P0MT?P1'?P0'MT')×100%(2)式中:MT——实验组食品模拟物干物质质量(g);MT′——对照组食品模拟物干物质质量(g);P1——实验组滤液中游离氨基酸的含量(g);GB/TXXXXX–20123GB/TXXXXX—2012IIGB/T××××—201×P1′——空白组滤液中游离氨基酸的含量(g);P0——实验空白组滤液中游离氨基酸的含量(g);P0′——对照空白组滤液中游离氨基酸的含量(g)。(3)进行计算:脂肪酸体外生成率C=(F1?F0MT?F1'?F0'MT')×100%(3)式中:MT——实验组食品模拟物干物质质量(g);MT′——对照组食品模拟物干物质质量(g);F1——实验组滤液中脂肪酸的含量(g);F1′——空白组滤液中脂肪酸的含量(g);F0——实验空白组滤液中脂肪酸的含量(g);F0′——对照空白组滤液中脂肪酸的含量(g)。(4)进行计算:还原糖体外生成率D==(S1?S0MT?S1'?S0'MT')×100%(4)式中:MT——实验组食品模拟物干物质质量(g);MT′——对照组食品模拟物干物质质量(g);S1——实验组滤液中还原糖的含量(g);S1′——空白组滤液中还原糖的含量(g);S0——实验空白组滤液中还原糖的含量(g);S0′——对照空白组滤液中还原糖的含量(g)。8重复性 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。GB/TXXXXX–20123GB/TXXXXX—2012IIGB/T××××—201×前言本标准按照GB/—2009给出的规则起草。本标准由中国标准化研究院提出并归口。本标准起草单位:本标准主要起草人:前言本标准按照GB/—2009给出的规则起草。本标准由中国标准化研究院提出并归口。本标准起草单位:本标准主要起草人:前言本标准按照GB/—2009给出的规则起草。本标准由中国标准化研究院提出并归口。本标准起草单位:本标准主要起草人:GB/TXXXXX–20123GB/TXXXXX—2012II