文档介绍：该【血红蛋白的提取和分离说课稿 】是由【胜利的喜悦】上传分享，文档一共【33】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【血红蛋白的提取和分离说课稿 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。血红蛋白两个α-肽链两个β一肽链四个亚铁血红素基团每个肽链围绕一种亚铁血红素基团,此基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳,血红蛋白因含有血红素而呈红色。血红蛋白的特点:本课题学****目的1、重要概念:①凝胶色谱法②电泳法③缓冲溶液④它们在血红蛋白的提取中分别起到什么作用。重要原理:①凝胶色谱法分离蛋白质的原理②电泳法分离样品的原理③缓冲溶液的构成和作用机理(一)凝胶色谱法(分派色谱法):大多数凝胶是由多糖类化合物(如葡聚糖或琼脂糖)构成的多孔小球体,内部有许多贯穿的通道。根据被分离物质的蛋白质相对分子质量的大小,运用品有网状构造的凝胶,来进行分离。:①当相对分子量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;②而相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。③根据的特性是:蛋白质分子量的大小。(二):在一定的范畴内,但凡能够抵制外加少量强酸或强碱的影响使原来溶液PH值基本保持不变的混合溶液。能够抵制外界的酸和碱对溶液PH值的影响,维持PH基本不变。::普通由1-2种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的使用比例就能够制得在不同PH范畴内使用的缓冲液。:在本课题中使用的缓冲液是:__________,其目的是:运用缓冲液模拟细胞内的PH环境,确保血红蛋白的正常构造和功效,便于观察(红色)和科学研究(活性)磷酸缓冲液(三)电泳::带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。:①许多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都含有可解离的基团,在一定的PH下,这些基团会带上正电或负电。②在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。③电泳运用了待分离样品中多个分子带电性质的差别以及分子本身的大小,形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中多个分子的分离。:琼脂糖凝胶电泳、聚丙稀酰***凝胶电泳。在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动琼脂糖凝胶电泳示意图聚丙烯酰***凝胶电泳1、在测定蛋白质分子量时惯用十二烷基硫酸钠(SDS)—聚丙烯酰***凝胶电泳。聚丙烯酰***凝胶是由单体丙烯酰***和交联剂N,N’-亚***双丙烯酰***在引发剂和催化剂的作用下聚合交联成的含有三维网状构造的凝胶。N,N’-亚***双丙烯酰***(形成交联)丙烯酰***和交联剂N,N’-亚***双丙烯酰***的交联共聚反映蛋白质在聚丙烯酰***凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素。(SDS的作用)为了消除净电荷对迁移率的影响,能够在凝胶中加入SDS。:SDS能使蛋白质发生完全变性。由几条肽链构成的蛋白质复合体在SDS的作用下会解聚成单条肽链,因此测定的成果只是单条肽链的分子量。SDS能与多个蛋白质形成蛋白质—SDS复合物,SDS所带负电荷的量大大超出了蛋白质分子原有的电荷量。因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。: