1 / 92
文档名称:

生化反应工程酶促反应动力学.ppt

格式:ppt   大小:1,708KB   页数:92页
下载后只包含 1 个 PPT 格式的文档,没有任何的图纸或源代码,查看文件列表

如果您已付费下载过本站文档,您可以点这里二次下载

分享

预览

生化反应工程酶促反应动力学.ppt

上传人:业精于勤 2024/5/10 文件大小:1.67 MB

下载得到文件列表

生化反应工程酶促反应动力学.ppt

相关文档

文档介绍

文档介绍:该【生化反应工程酶促反应动力学 】是由【业精于勤】上传分享,文档一共【92】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【生化反应工程酶促反应动力学 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。酶的基本概念什么是酶?酶是生物体为其自身代谢活动而产生的生物催化剂。“经典”酶学理论:酶→蛋白质。部分RNA也具有生物催化能力,通常称之为“核酶”。1982年,,具有自身切接能力。核酶的数量少,多作用于核酸。*生化反应工程酶促反应动力学*酶的分类根据国际酶学委员会的规定,按照酶进行催化反应的类型,可将酶分为6类:(oxidoreductases):羰基还原酶;(transferases):氨基转移酶;(hydrolases):***水解酶;(lyases):***酸脱羧酶;(isomerases):葡萄糖异构酶;(或合成)酶(ligases):T4DNA转接酶。蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶?*生化反应工程酶促反应动力学*酶的功能酶的催化共性:a、降低反应的活化能;b、酶可改变反应速率;c、不改变反应的平衡常数。/mol*生化反应工程酶促反应动力学*酶的功能酶的生物催化特性:a、有很强的专一性:底物专一性、反应专一性、立体专一性等;b、有较高的催化效率:比非催化反应高108-1020倍;c、酶的调节功能:抑制剂和激活剂调节、反馈抑制调节、共价修饰调节和变构调节等酶的催化效率可用酶活表示。酶活的定义:国际酶学委员会规定,在一定条件下,1min能催化1umol底物转化为产物所需要的酶量为一个国际酶活单位(IU)。*生化反应工程酶促反应动力学*酶的稳定性引起酶失活的原因:a、酶活性中心特定氨基酸(或其它)残基被化学修饰;b、外部环境的影响;c、酶的高级结构变化;d、多肽链的断裂。*生化反应工程酶促反应动力学*酶的稳定性稳定化方法稳定的原因低温(冷冻保存)难以被化学物质或蛋白酶等破坏添加盐类加入高浓度硫酸铵后,酶高级结构的稳定性增强添加底物保护酶的活性中心添加有机溶剂如加***,但机制不清楚化学修饰稳定酶的高级结构,保护酶的活性中心加入强变性剂只要保留一级结构,仍可再生加入蛋白质保护在稀薄状态下易发生变性失活的酶类结晶化有利于高级结构的稳定固定化防止或减少蛋白酶的作用保持酶稳定的方法*生化反应工程酶促反应动力学*难以被化学物质或蛋白酶等破坏当外扩散速率很慢时,外扩散为限制步骤,此时:VS0为在外扩散速率很快时的最大的反应速率。当[S]=Km时, 。缺点:酶吸附不牢固,易脱落;当底物接近酶的活性中心并与之结合时,酶的构象能发生改变,更适合于底物的结合。②ES在反应开始后与E及S迅速达到动态平衡。c、酶的调节功能:c、酶的高级结构变化;a、酶活性中心特定氨基酸(或其它)残基热稳定性、保存和使用稳定性。Vd为在外扩散速率很慢时的最大的传质速率。不考虑P+E→ES这个可逆反应的存在。②ES的生成速率与其解离速率相等,其浓度不随而变化。底物浓度[S]远大于酶的浓度[E],因此[ES]的形成不会降低底物浓度[S],底物浓度以初始浓度计算。其测定方法有以下3种:petitiveinhibitions)生物工业用酶大多为水溶性,酶促反应体系为均相体系,均相体系简单,但存在一个缺点,就是酶难以回收利用,同时,酶和产物混在一起,给产物的提取带来困难。底物专一性、反应专一性、立体专一性等;?指酶与反应物系处于同一相(液相)的酶催化反应。葡萄糖脱氢酶葡萄糖葡萄糖酸水相*生化反应工程酶促反应动力学*酶促反应动力学基础锁钥模型(LockandKeyModel)酶与底物的作用机理解释了酶的专一性;局限性:无法解释可逆反应。*生化反应工程酶促反应动力学*酶与底物的作用机理诱导契合模型(Induced-FitModel)像手与手套的关系。当底物接近酶的活性中心并与之结合时,酶的构象能发生改变,更适合于底物的结合。*生化反应工程酶促反应动力学*蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶?反之,Da准数愈大,固定化酶表面浓度[S]s愈小,愈趋近零,ηout越小,表明最大反应速率愈大于最大传质速率,过程为传质控制。分子构象的改变(常见于吸附法和共价偶联法)KS=k-1/k1:解离常数,饱和常数产物抑制(productinhibitions)由于[S]>>[E0],所以[S]>>[ES],[S]-[ES]≈[S]产物由内向外表面扩散;固定化酶:水溶性酶通过物理和化学的方法,使之与不溶性载体结合形成的一种不再溶解的酶。d、多肽链的断裂。只要保留一级结构,仍可再生Linewever-Burk双倒数法均相酶促反应动力学:酶与底物的作用方式、影响酶促反应的因素、单底物酶促反应动力学方程的推导。沿着传质的方向有底物、产物的浓度的分布无外扩散影响时的固定化酶外表面的反应速率反竞争性抑制(petitiveInhibitions)包埋法——格子型固定化酶:一步失活常数外部因素(温度,pH,压力,溶液的介电常数,离子强度等)稳定酶的高级结构,保护酶的活性中心d、多肽链的断裂。固定化酶促反应中的过程分析因此可以用Km值来鉴别酶。影响酶促反应的因素浓度因素(酶浓度,底物浓度,产物浓度等)外部因素(温度,pH,压力,溶液的介电常数,离子强度等)内部因素(酶的结构等)*生化反应工程酶促反应动力学*