文档介绍：该【基因工程载体和工具酶92周 】是由【相惜】上传分享，文档一共【34】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【基因工程载体和工具酶92周 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。第二章基因工程载体和工具酶ChapterIIicengineering,精选ppt【载体〔Vector〕】基因工程操作中,把能携带目的基因进入宿主细胞并进行扩增和表达的工具叫载体。精选ppt【工具酶】是基因重组技术不可缺少的工具,主要用于核酸分子的切割、连接、聚合、修饰、反转录等有关的各种酶系统。主要有限制性内切酶、连接酶、核酸聚合酶、磷酸酶和磷酸激酶、逆转录酶等。精选ppt精选ppt基因克隆的本质是使目的基因在特定的条件下得到扩增和表达,而目的基因本身无法进行复制和表达、不易进入受体细胞、不能稳定维持,所以就必须借助于“载体〞及其“寄主细胞〞来实现。精选ppt【载体】能载带微量物质共同参与某种化学或物理过程的常量物质,在基因工程操作中,把能携带目的基因进入宿主细胞并进行扩增和表达的工具叫载体。三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和植物病毒。精选ppt〔1〕载体必须是复制子。具有复制起始点,最好要有较高的自主复制能力。〔2〕有选择性标记,如抗Kan、抗Amp〔3〕有一段多克隆位点外源DNA插入其中,不影响其复制〔4〕分子量小,拷贝数多〔5〕容易从宿主细胞中别离纯化精选ppt〔1〕载体必须是复制子。最好要有较高的自主复制能力。【复制子〔replicon〕】是DNA复制时从一个DNA复制起点开始最终由这个起点起始的复制叉完成的片段。。精选ppt〔2〕有选择性标记①抗生素抗性标记基因:标记基因是与外源目的基因构建在同一表达载体上,一起转化进入细胞,而后在特定条件下帮助筛选出已转化的细胞。精选ppt②蓝白筛选:pUC19等载体携带细菌lac操纵子中的lacZ基因编码,β-半乳糖苷酶N端状146个氨基酸的段落,当培养基中含有诱导物IPTG和Xgal时,lacZ‘基因被诱导表达产生的β-半乳糖苷酶N端肽与宿主菌表达的C端肽互补而具有β-半乳糖苷酶活性〔质粒和宿主编码的肽段各自都没有酶活性,两都融为一体而具酶活性,称为α-互补,plementation〕,半乳糖苷酶水解Xgal而使菌落呈现蓝色;精选ppt