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、比较所得结果的真实记载,、,《植物组织培养大实验》课程实验报告由5次综合实验报告组成,即:1、《植物组织培养大实验》综合报告〔一〕〔必做〕:实验用具的洗涤和灭菌、ms培养基母液与ms培养基的配制和灭菌;2、《植物组织培养大实验》综合报告〔二〕〔必做〕:植物外植体消毒和接种;3、《植物组织培养大实验》综合报告〔三〕〔必做〕:愈伤组织的诱导〔又称原代培养或初代培养〕;4、《植物组织培养大实验》综合报告〔四〕〔必做〕:愈伤组织的继代培养;5、《植物组织培养大实验》综合报告〔五〕〔选做〕:愈伤组织的生根培养〔植株再生〕.学生在写《植物组织培养大实验》综合报告时,实验报告中的实验内容、实验目的、实验原理、仪器设备和试剂等4部分可按照教师拟定的《植物组织培养大实验》综合报告〔一〕至〔五〕,,综合报告中的实验结果与分析、思考题2部分内容,要求学生必需独立完成.《植物组织培养大实验》综合报告〔一〕〔必做〕[实验内容]实验用具的洗涤和灭菌、ms培养基母液与ms培养基的配制和灭菌[实验目的]1、掌握植物组织培养中常用实验用具的洗涤、灭菌方法与注意事项;2、掌握ms培养基母液的配制方法和注意事项;3、掌握ms培养基的配制、灭菌方法和注意事项.[实验原理]对植物外植体进行离体培养时,、碳源、维生素、,配制成一系列的母液置于冰箱保存,:大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液、有机化合物母液、<未经处理的>空气中的物体,,特别是含糖量较高,是微生物滋生、,如果培养基被微生物所污染,,培养基的灭菌,,验田采用高压蒸气灭菌法〔即湿热灭菌法,其原理是:在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,,锅内温度达121℃.在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌与其高度耐热的芽孢.[仪器设备和试剂]1、仪器设备高压蒸气灭菌锅,电子天平,冰箱,烧杯〔100ml,500ml,1000ml〕,量筒〔50ml,100ml,1000ml〕,试剂瓶〔100ml,500ml,1000ml〕,三角瓶〔50ml,100ml,250ml〕,培养瓶〔100ml,150ml〕或培养皿〔d90mm,d120mm〕,洗耳球、刻度吸管,ph试纸,漏斗,玻璃棒,记号笔,线绳,牛皮纸或报纸,***钾<k2cr2o7>、硫酸<h2so4>、***钾〔kno3〕、***铵〔nh4n03〕、硫酸镁〔mgs04·7h20〕、磷酸二氢钾〔kh2po4〕、***化钠〔cacl2·2h20〕、硫酸锰〔mn04·4h20〕、硫酸锌〔zns04·7h20〕、硼酸〔h3bo3〕、碘化钾〔ki〕、钼酸钠〔namo04·2h20〕、硫酸铜〔cus04·5h2o〕、***化钴〔cocl2·6h20〕、乙二***四乙酸二钠〔na2-edta〕、硫酸亚铁〔fes04·7h20〕、甘氨酸、盐酸硫***素〔vit·b1〕、盐酸吡哆素〔vit·b6〕、肌醇、2,4-d、6-ba、1mol/l盐酸、1mol/l氢氧化钠、蔗糖、琼脂.[实方法验]1、简述玻璃器皿的洗涤和灭菌方法;2、简述ms培养基母液〔包括大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液、有机化合物母液、植物生长物质母液等5种母液〕的配制方法;3、简述ms培养基配制〔按照配制1l培养基的量进行描述〕和灭菌方法.[思考题]1、什么是植物组织培养概念?在含有营养物质与植物生长物质的培养液中,培养离体植物组织〔器官或细胞〕并诱导使其长成完整植株的技术植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论,,,原生质体等,通过无菌操作,,,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,、什么是外植体的含义?根据外植体的不同,植物组织培养可以分为几种类型?外植体用于离体培养的初始材料称为外植体,如在植物快速繁殖中从母株上切取的、用于消毒培养的茎芽、茎段、,、数量、消毒难易程度、、植物组织培养有哪些特点?形态类似,结构相同,功能相同8/:组织培养得到的植物体的遗传物质与原植物体的遗传物质完全相同,表现出的性状完全一样〔排除基因突变等情况〕.需要注意的是如果用亲本的花粉进行组织培养,那么得到的植株会是单倍体,:基因的选择性表达4、ms培养基包括哪些成分?各有什么作用?5、采用高压蒸汽锅高压灭菌时,应注意哪些事项?<4>,应注意排净锅内冷空气,锅内冷空气如排放不净,会影响灭菌效果,,要使用温度高达120℃、两6、简述植物组织培养与农业生的产关系?7、灭菌和消毒有无差别?为什么?消毒是指用物理或化学方法消灭某种X围内的有害微生物,,进行食用菌组织分离时,子实体表面必须进行消毒,消灭体表杂菌,,完全杀死培养基或器物内外的一切微生物,:、,:〔disinfection>是指杀死病原微生物、.《植物组织培养大实验》综合报告〔二〕〔必做〕[实验内容]植物外植体消毒和接种[实验目的]学****和掌握植物外植体表面消毒的常规方法.[实验原理]用于进行组织培养的组织、,外植体如果是带菌的,在接种前都必须进行表面消毒,,再经无菌操作手续接到培养基上,这一过程叫做接种.[实验材料]水稻成熟胚[仪器设备和试剂]1、仪器设备超净工作台,酒精灯,烧杯,镊子,剪刀,手术刀,无菌吸水纸,一次性手套,标签纸,、试剂ms培养基,%***化***,75%乙醇,无菌水.[实验方法]1、试述外植体〔水稻成熟胚〕、试述外植体〔水稻成熟胚〕的接种方法〔包括接种前、接种、接种后等3个操作环节〕.[实验结果与分析]篇五:植物组织培养实验报告植物组织培养实验报告一实验目的让植物组织经过脱分化作用,形成愈伤组织,经过再分化作用,愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官,,组织以至单个细胞,应用无菌操作使其在人工条件下,能够继续生长,,原来已经分化停止9/10又能重新分裂,形成没有组织结构的细胞团,〞,已经脱分化〞的愈伤组织,在一定条件下,又能重新分化形成输导系统以与根和芽等组织和器官,这一过程称再分化作用〞.植物激素在此过程中起着重要的作用,吲哚乙酸〔iaa〕和6–苄基氨基腺嘌呤〔6–ba〕的比例,〔一〕试剂乙醇、iaa或2,4–d、hgcl2〔或次***酸钠〕、6-苄基氨基腺嘌呤〔6-ba〕ms培养基〔二〕仪器设备培养室,高压灭菌锅,水浴锅,解剖刀,三角烧瓶〔100ml〕,烧杯,量筒,培养皿,超净工作台,分析天平,长镊子,剪刀,〔1〕愈伤组织诱导培养基:ms培养基〔蔗糖含量为10g/l,2,4–d含量为2mg/l,琼脂10g/l〕.〔2〕试验培养基:在ms培养基中按表33–1加入iaa和6–,6-,然后用蒸馏水稀释,,,趁热分装于100ml三角烧瓶中,,用两层称量纸包扎瓶口,并用橡皮筋扎牢,然后在高压灭菌锅中121〔1kg/cm2〕,〔如长镊子、解剖刀、剪刀等〕与灭菌水,〔1〕取健壮的玫瑰、菊花茎数段,每段约5cm长,%***化***〔升***〕浸泡20min,取出用无菌水洗3~4次,置于无菌培养皿中,在接种箱中按无菌操作要求剥去外皮〔接种箱事先用紫外灯灭菌30min〕,用解剖刀切成5mm厚的圆片〔弃去开始一片和最后一片〕,用长镊子将它接种在诱导培养基上,注意圆片的切口朝向培养基,每瓶接种4片,接种后扎好瓶口.〔2〕将已接入植物组织〔外植体〕的三角烧瓶,培养在25℃温室中,每星期检查l~2次,剔除材料已被杂菌污染的三角烧瓶,3~4周后产生愈伤组织.〔3〕选取愈伤组织生长良好的三角烧瓶,用解剖刀将愈伤组织切下,转移到含有不同激素的试验培养基中〔也可以连同原来的外植体一起转移〕,每瓶放1~2块,仍培养在25℃温室中,每周1~2次观察不同处理的三角烧瓶中,愈伤组织分化情况,〞,,大部分都失败了,,形成愈伤组织,经过再分化作用,愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官,