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一种利用细菌发酵产酶水解海参皂苷的方法.docx

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一种利用细菌发酵产酶水解海参皂苷的方法.docx

上传人:开心果 2024/5/28 文件大小:17 KB

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文档介绍:该【一种利用细菌发酵产酶水解海参皂苷的方法 】是由【开心果】上传分享,文档一共【5】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【一种利用细菌发酵产酶水解海参皂苷的方法 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。一种利用细菌发酵产酶水解海参皂苷的方法专利名称:一种利用细菌发酵产酶水解海参皂苷的方法技术领域:本发明涉及一种水解海参皂苷的方法,尤其是一种使用细菌发酵产酶水解海参皂苷并转化成海参皂苷元的方法。背景技术:·海参为棘皮动物门、海参纲、楣手目动物,是重要的海洋食用和药用资源,含有皂苷、多糖、胶原多肽等活性物质,具有提高免疫力、抗疲劳、抑癌、降血脂等作用。随着生活水平的提高和保健意识的增强,海参食用量逐年增加,因此海参的加工量越来越大,而蒸煮海参的废弃液也越来越多。研究表明,海参废弃液中还有大量的蛋白质、粘多糖和皂苷等营养物质,如果海参废弃液不被加工利用,不仅造成了资源浪费,而且极易造成环境污染。目前,工业上水解皂苷的方法为直接酸水解法,其存在的问题是水解所需的酸量很大,所产生的酸性有机废水、废渣对周围的环境会造成严重的污染;而且设备、管线腐蚀严重,存在安全隐患。因此研究新的皂苷水解工艺,避免使用高污染的盐酸、硫酸等无机强酸催化剂是解决以上问题的根本途径。发明内容本发明的目的在于提供一种海参皂苷的水解方法,以解决无机酸催化水解带来的污染、腐蚀等问题,促进海参加工废弃液中有效成分的综合利用。本发明的技术解决方案是一种酶法水解海参皂苷方法,其特征在于用细菌发酵产酶水解海参皂苷转化成海参皂苷元。所述的酶是以海参皂苷为发酵产酶诱导物,该酶由细菌发酵方法制备,产出能水解海参皂苷的酶,并大大提高其产酶量。发酵方法采用液态发酵法,液态发酵产酶、除菌除杂、即成发酵酶液;将发酵酶液中加入硫酸铵,收集沉淀,用1/10体积的缓冲液溶解沉淀,除杂,即得浓缩的粗酶液;该粗酶液经酶蛋白分离中常用的离子交换树脂柱或者电泳方法分离得到将海参阜苷转化成海参阜苷元的纯酶。上述酶处理海参皂苷,使海参皂苷转化成海参皂苷元,其酶的反应温度为400C60°C,pH值为58,反应时间20小时。本发明同现有技术相比,最大的特点是在细菌发酵中加入了海参皂苷作为产酶诱导物,大大提高能水解海参皂苷的酶的产量,同时克服了酸法水解存在的污染严重、目的性差等缺点,具有无污染、目的性强、转化率高的优点。%大豆浸出物、2%可溶性淀粉、产酶诱导物-海参蒸煮废弃液、%MgS0j§养基中,在温度50°C条件下通风培养30小时,离心除菌得上清液(含酶混合液),往上清液中加入60%饱和度的硫酸铵沉淀酶蛋白,、,离心除杂,冻干,得到海参皂苷酶;转化过程将Ig上述海参皂苷酶、50毫升海参蒸煮废弃液浓缩液、400毫升醋酸缓冲液(,)和50毫升无水乙醇混合均匀,在温度40°C条件下搅拌反应20小时。反应后加入2倍体积的无水乙醇,过滤除去蛋白沉淀,滤液减压蒸干,再用50倍质量的石油醚作为有机溶剂进行索氏提取,提取温度为80°C,提取时间为12h,蒸馏抽提液回收石油醚,SP得海参皂苷元,%。%大豆浸出物、5%可溶性淀粉、产酶诱导物-海参蒸煮废弃液、%MgS04培养基中,在温度55°C条件下通风培养35小时,离心除菌得上清液(含酶混合液),往上清液中加入60%饱和度的硫酸铵沉淀酶蛋白,、,离心除杂,冻干,得到海参皂苷酶;转化过程将Ig上述海参皂苷酶、50毫升海参蒸煮废弃液浓缩液、400毫升醋酸缓冲液(,)和50毫升无水乙醇混合均匀,在温度50°C条件下搅拌反应20小时。反应后加入2倍体积的无水乙醇,过滤除去蛋白沉淀,滤液减压蒸干,再用50倍质量的石油醚作为有机溶剂进行索氏提取,提取温度为80°C,提取时间为12h,蒸馏抽提液回收石油醚,SP得海参皂苷元,%。%大豆浸出物、8%可溶性淀粉、产酶诱导物-海参蒸煮废弃液、%MgS04培养基中,在温度60°C条件下通风培养35小时,离心除菌得上清液(含酶混合液),往上清液中加入60%饱和度的硫酸铵沉淀酶蛋白,、,离心除杂,冻干,得到海参皂苷酶;转化过程将Ig上述海参皂苷酶、50毫升海参蒸煮废弃液浓缩液、400毫升醋酸缓冲液(,)和50毫升无水乙醇混合均匀,在温度60°C条件下搅拌反应20小时。反应后加入2倍体积的无水乙醇,过滤除去蛋白沉淀,滤液减压蒸干,再用50倍质量的石油醚作为有机溶剂进行索氏提取,提取温度为80°C,提取时间为12h,蒸馏抽提液回收石油醚,SP得海参皂苷元,%。上述实施例不作为对本发明的限定,凡在本发明的范围内所作的任何修改、等同替换、改进等,均属于本发明的保护范围。,其特征是以海参皂苷为发酵产酶诱导物,由细菌发酵方法制备;发酵方法采用液态发酵法。,其特征是上述酶处理海参加工废弃液中的皂苷,使海参皂苷转化成海参皂苷元。,其特征是酶的反应温度为40。。,,反应时间20小时。全文摘要本发明公开了一种利用细菌发酵产酶水解海参皂苷的方法,其特征在于用酶水解海参加工废弃液中的皂苷,所述的酶是以海参皂苷为发酵产酶诱导物,由细菌发酵制备。用产出的酶处理海参皂苷,与常规酸水解方法相比,本发明工艺简单,可大幅度缩短水解时间,水解条件温和,海参皂苷的水解转化率最高可达98%,并且克服了酸水解法所存在的对皂苷破坏性大、污染严重、目的性差等缺点,是一种无污染、目的性强、低碳、环境友好的水解新工艺技术。