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别法:从愈伤组织制备小细胞团或单细胞悬液;③原生质体再生法:纤维素和果胶酶混合处理外植体或愈伤组织,分别原生质体,再生培育基中培育,原生质体细胞壁再生获得植物细胞。固体培育是在培育基中参与确定的凝固剂如琼脂,加热溶解后,分别装入培育容器中,冷却后分散成固体培育基。优点:简便易行、培育占空间小缺点:①外植体或愈伤组织仅有一局部与培育基接触,导致该局部养分物质快速吸取而形成培育基中养分物质的浓度差,产生愈伤组织生长的不平衡。②外植体基部插入固体培育基中,该处呈现气体交换不畅,阻碍了组织呼吸作用的正常进展,同时会积存生长过程中排出的有害物质。③静止状态下,由于重力作用,以及光线从上部或侧部射入,因而在愈伤组织细胞间消灭极化现象,导致细胞群体的不均匀状态。④固体培育物有时需要测定生理生化指标,必需将其转入液体中,此时组织会很快膨胀,从而转变了组织在固体培育基中所具有的形态及生理状态。其中琼脂是最常用的固化剂,%~%;明胶的使用浓度通常为10%。固体培育和液体培育相互协作是组织/细胞培育的常规操作。温度保持25度左右;光照因材料不同而异,一般为日光灯照耀,每天16h为宜。液体培育系统包括分批培育法、半连续培育法、连续培育法、固定化培育法。将培育基一次性地参与反响器中,接种、培育确定时间后收获细胞的操作方式称为成批培育法。在反响器中投料和接种培育一段时间后,将局部培育液和颖培育液进展交换的培育方法称半连续培育法。连续培育法是利用连续培育反响器,在投料和接种培育一段时间后,以确定速度连续采集细胞培育液,并以同样速度供给颖培育基以使细胞生长环境长期维持恒定的方法。固定化培育就是将被培育生物体固定在确定的培育基上进展培育的过程。影响植物次级代谢产物积存的因素有:影响因素主要有:①生物条件,外植体、季节、休眠、分化等;②物理条件,温度、光照、通气、pH、渗透压等:③化学条件,无机盐、C源、植物生长调整剂、维生素、氨基酸、核酸、抗生素等;④工业培育条件:培育罐类型、搅拌通气和培育方法等。两步培育法即第一步使用适合细胞生长的培育基,称为生长培育基,其次步使用适合于次级代谢产物合成的培育基,称为生产培育基。两种培育基各有特点:生长培育基是为了实现细胞的高生产率,生产培育基通常具有较低含量的***盐和磷酸盐,并含有较低的糖分或较少的碳源。植物细胞培育的培育基由哪些主要成分组成?答:无机盐,碳源,植物生长调整剂,有机氮源,维生素。脱分化:已经分化的细胞,组织和器官在人工培育的条件下又变成未分化的细胞和组织的过程。再分化:通过脱分化诱导形成的愈伤组织在适宜的培育条件下可再分化成为胚状体或直接分化出器官。外植体:指用于植物组织培育的器官或组织。突变体:经过确证已发生遗传突变或的培育物至少是通过一种诱变处理而发生变异所得的细胞。无性生殖技术:又称为养分生殖,是指直接利用母体的枝条,根,芽等养分器官的再生力气进展生殖后代。第七章酶工程制药酶工程是酶学和工程学相互渗透结合、进展而形成的一门的技术学科。它是从应用的目的动身争论酶、应用酶的特异催化性能,并通过工程化将相应原料转化成有用物质的技术。酶的来源有生物合成法和化学合成。目前工业生产一般都以微生物为主要来源,利用微生物生产酶制剂,具有如下优点:①微生物种类繁多,酶的品种齐全;②微生物生长生殖快、生产周期短、产量高;③培育方法简洁,原料来源丰富,价格低廉;④微生物具有较强的适应性和应变力气,可以通过各种遗传变异的手段,培育出的高产菌株。作为一个优良的产酶菌种应具备以下几点要求:①生殖快、产酶量高,酶的性质应符合使用要求,而且最好是产生胞外酶的菌。②不是致病菌,在系统发育上与病原体无关,也不产生有毒物质。这一点对医药和食品用酶尤为重要。③产酶性能稳定,不易变异退化,不易感染噬菌体。④能利用廉价的原料,发酵周期短,易于培育。