〖医学〗目的基因的克隆PCR法扩增目的基因片断.ppt

文档介绍：目的基因的克隆— PCR法扩增目的基因片断
PCR(Polymerase Chain Reaction),聚合酶链式反应,模拟了发生在细胞内的DNA复制的过程
DNA的结构(1)
三磷酸核糖核苷NTP
三磷酸脱氧核糖核苷dNTP
三磷酸双脱氧核糖核苷ddNTP
DNA的结构(2)
A腺嘌呤
G鸟嘌呤
C胞嘧啶
U尿嘧啶
T胸腺嘧啶
五种碱基
A-T C-G
DNA的结构(3)
氢键维持了DNA的双螺旋结构
DNA的复制(1)
3’-OH进攻5’- Pi
DNA聚合酶催化
DNA的延伸方向:5‘->3’
DNA的复制(2)
DNA复制相关蛋白
在复制起始点打开
双链DNA
然后DNA解链酶
结合到单链DNA上
进一步解开双链DNA
DNA的复制(3)
DNA的复制和体外的模拟
模板(母链) 细胞内源外源加入
打开双链解链酶加热变性
维持单链单链结合蛋白高温
引物引物合成酶外源加入
底物dNTP 细胞内源外源加入
聚合酶细胞内源外源加入
反应环境细胞内环境缓冲液
PCR循环--变性