文档介绍：中文说明书 UNIONHONEST
酶联免疫吸附测试 Enzyme Linked Immunosorbent Assay
人(Human)过氧化物酶增殖体激活受体(PPAR-γ) ELISA 检测试剂盒
本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆
试验原理:
PPAR-γ试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知PPAR-γ浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将PPAR-γ和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中PPAR-γ的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存)
96孔配置
48孔配置
配制
96/48人份酶标板
1块板(96T)
半块板(48T)
即用型
塑料膜板盖
1块
半块
即用型
标准品:
1瓶()
1瓶()
按说明书进行稀稀
空白对照
1瓶()
1瓶()
即用型
标准品稀释缓冲液
1瓶(5ml)
1瓶()
即用型
生物素标记的抗PPAR-γ抗体
1瓶(6ml)
1瓶()
即用型
亲和链酶素-HRP
1瓶(10ml)
1瓶()
即用型
洗涤缓冲液
1瓶(20ml)
1瓶(10ml)
按说明书进行稀释
底物A
1瓶()
1瓶()
即用型
底物B
1瓶()
1瓶()
即用型
终止液
1瓶()
1瓶()
即用型
标本稀释液
1瓶(12ml)
1瓶()
即用型
自备材料
蒸馏水。
加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---