文档介绍：醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质
实验目的
学****醋酸纤维薄膜电泳的操作,了解电泳技术的一般原理
带电荷的粒子或分子在电场中向本身带电相反的方向移动的现象称为电泳
实验原理
各种蛋白质由氨基酸组成,其分子量、所带电荷数量、电场强度及形状不同,在电场中的移动速度不同
本实验以醋酸纤维素为电泳支持物,
分离各种血清蛋白染色后可显示5条区带,分别为血清中含有清蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白
影响因素
影响电泳的外界因素:电场强度、溶液的pH值
影响电泳的内在因素:蛋白质所带净电荷的量、蛋白质的大小和形状
采用醋酸纤维薄膜作为支持物的电泳方法称为醋酸纤维素薄膜电泳。醋酸纤维素薄膜电泳具有微量、快速、简便、分辨力高,对样品无拖尾和吸附现象等优点
醋酸纤维薄膜电泳方法的优点
三、实验器材
DYY-Ⅲ2型常压电泳仪
卧式水平电泳槽
电泳仪由电泳槽和稳压电源两部分组成,,两者之间有专门的连线连接。电泳槽有两个互相隔离的槽,各自装有缓冲液,接不同的电极,红色为正极,黑色为负极。
每个槽上都有一根可移动的横杆,滤纸或纱布的一头搭在横杆上,另一头浸入缓冲液中,形成了滤纸桥。两杆之间的距离调节到略小于醋酸纤维薄膜的长度,点好样的醋酸纤维薄膜就搭在滤纸桥上。
盖上盖子,通电,调整好电压,进行电泳。注意电泳槽的电极方向,负极应与醋酸纤维薄膜上的点样原点在同一侧。
操作指南
四、实验试剂
(,):,,用蒸馏水定容至1000mL
:氨基黑10B ,用甲醇50mL、冰醋酸10mL、水40mL溶解(可重复使用)
:95%乙醇45mL,冰醋酸5mL,水50mL,混匀
(仅在定量分析时使用):无水乙醇80mL,冰醋酸20mL,混匀