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中国生物工程杂志
第 23 卷第 10 期 CHINA BIOTECHNOLOGY 2003 年 10 月
单宁酶反胶束微反应器生产没食子酸戊酯的研究
王征1 罗泽民1 卢向阳1 毛清黎2
(1 湖南农业大学理学院长沙 410128 2 孝感学院生物系孝感 432100)
摘要 2研2究利用单宁酶微2 反2 应器生产没食子酸戊酯(amyl gallate ,AG) 的方法。采用 AOT(双(2 乙
3 基己基) 磺基琥珀酸钠) 异辛烷水组成的微反应器首次成功合成了没食子酸戊酯。并对反应体
系中的各种主要参数对反应底物没食子酸(gallic acid , GA) 的转化率的影响进行了探索。研究表
明,反应条件为 pH = 6 ,温度 45 ℃, [AOT] = 0 20mol L ,振荡速度为 150r min 时, W0 = 10 或 12 5
( W0 = [水] [表面活性剂]) 的条件下,没食子酸的转化率在反应 96h 都可以达到 90 %。
关键词微反应器反胶束单宁酶没食子酸没食子酸戊酯
胶束酶学的兴起,使分散在有机相中的含酶水介质的特性和优点,我们用单宁酶在此有机介质中
滴作为微型反应器的概念已普遍为人们所接受。催化酯合成反应,合成抗氧化剂没食子酸戊酯,拟
微反应器指分散在有机相中的增溶了酶的反胶束。探讨和研究单宁酶的应用范围。
它是表面活性剂在有机溶剂中自发形成的纳米尺
1 材料与方法
度的一种聚集体,其溶液是透明的、热力学稳定的
系统。体系中表面活性剂的分子膜类似于生物细 1 1 实验材料
胞膜类脂分子的定向排列可以控制底物或产物分单宁酶(自制[8 ] ) 、没食子酸(张家界贸源化工
子的有向进出,从而为酶催化反应提供了一个独特有限公司提供, 97 %以上) 、双(2 乙基己基) 磺基琥
的微环境。这个微环境可看成是一个个酶反应器, 珀钠(AOT) 、异辛烷、戊醇,各种分析纯有机试剂用
不但为底物和酶提供了巨大的作用界面,其体系中前均经过 4 型分子筛干燥。
的表面活性剂分子膜的存在又可避免酶与周围的 1 2 实验方法
有机溶剂接触,保护酶的活性部位不因暴露于有机 1 2 1 反胶束单宁酶微反应器的制备 A 体系:
溶剂中而失活。一些酶的反胶束微反应器已有应 AOT 异辛烷溶液; B 体系:没食子酸戊醇溶液; C
用研究报道[1 ] ,例如,利用脂肪酶[2 ] 、胰凝乳蛋白体系:一定量酶粉溶解于柠檬酸缓冲液。取 A 体
酶[3 ] 、辣根过氧化物酶[4 ] 在反胶束微反应器中合成系 3ml ,B 体系 540μl 混合均匀,在旋涡振荡的条件
酯类、短肽、聚苯酚等。下逐滴加入 C ,保持溶液澄清,反应体系酶浓度为
没食子酸酯是以我国丰富资源没食子酸为原 0 6mg mL 。置于恒温振荡器 150r min 振荡反应。
料生产的抗氧化剂和治疗心血管疾病药物,传统的 1 2 2 薄层层析定性检测产物生成见文献[9 ]
化学合成方法副产物多,污染严重,能源消耗大[5 ] 。 1 2 3 液相色谱测定没食子